Лекарственные препараты

УФ-спектоскопия является неотъемлемой часть фармацевтического анализа для установления подлинности лекарственных веществ.
Выводы
1. Показано, что лекарственные вещества группы фторхинолонов имеют характерные УФ-спектры. Основной максимум поглощения в зависимости от растворителя находится в диапазоне от 270 до 310 нм.
2. Показано, что ввиду высоких значений удельного показателя поглощения оптимальная концентрация испытуемого раствора составляет 5 мкг/мл.
3. Метод УФ-спектрофотометрии можно использовать для установления подлинности лекарственных средств группы фторхинолонов в виде субстанций и в лекарственной форме “таблетки". Для извлечения фторхинолонов из таблеток необходимо использовать 0,01 М раствор кислоты хлористоводородной.

...

Введение 3
Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях спектра 4
Пример использования метода УФ-спектрофотометрии для установления подлинности лекарственных средств 13
Заключение 24
Список литературы 25

Среди задач фармацевтической химии, таких как моделирование новых лекарственных средств и их синтез, изучение фармакокинетики и др., особое место занимает анализ качества лекарств. Сборником обязательных общегосударственных стандартов и положений, нормирующих качество лекарственных средств является Государственная фармакопея.
Фармакопейный анализ лекарственных средств включает в себя оценку качества по множеству показателей. В частности, устанавливается подлинность лекарственного средства, анализируется его чистота и проводится количественное определение. Первоначально для проведения такого анализа применяли исключительно химические методы: реакции подлинности, реакции на содержание примесей и титрование при количественном определении (метод, также основанный на химическом взаимодействии) . В последние годы наметилась тенденция к переходу на расширенное использование физических и физико-химических методов анализа.
При проведении фармацевтической экспертизы фармацевтических субстанций одной из основных задач является подтверждение ее подлинности, определение количественного содержания активного компонента, а также идентификация и количественное определение посторонних примесей, в том числе остаточных органических растворителей. С этой целью, как правило, используются традиционные физико-химические методы анализа (ГЖХ, ВЭЖХ, тонкослойная хроматография, ИК-спектроскопия и УФ-спектрофотометрия) .
Целью настоящей работы является изучение подлинности лекарственных спецсредств методами УФ-спектроскопии.

Некоторые испытания на подлинность с использованием УФ-спектрофотометрии требуют применения стандартных образцов лекарственных веществ. В этом случае проба стандартного образца должна быть изготовлена и одновременно определена в тех же условиях, что и испытуемое вещество.УФ-спектр 0,0005 % раствора этинилэстрадиола в 95 % спирте имеет максимумы и минимумы при тех же длинах волн, что и раствор стандартного образца, одинаковой концентрации и одновременно измеренный; соответствующие величины поглощения, рассчитанные на сухое вещество, при максимуме поглощения около 281 нм не отличаются более чем на 3 %.Этот прием обеспечивает наиболее достоверные результаты, однако связан с обязательным применением стандартного образца.Иногда величину поглощения при определенной длине волны указывают в виде удельного показателя Е1% 1см. Удельный показатель поглощения левомицетина при длине волны 278 нм равен 290—305.В ряде случаев (производные кислоты барбитуровой, сульфаниламиды, фенолы и др.) характер спектра может изменяться в зависимости от значения рН раствора, поэтому в частной фармакопейной статье указывается значение рН, при котором проводится изменение.Испытание на чистоту. УФ-характеристики в ряде случаев используются при испытаниях на чистоту и при исследовании стабильности лекарственных веществ, если изменения в характере спектра позволяют судить об изменениях вещества. При этом характерны те случаи, когда продукты разрушения поглощают в области, отличной от поглощения исследуемого вещества.Примером может служить определение примесей адреналона и норадреналона соответственно в адреналине и норадреналине. Полоса поглощения «кетонов» около 310 нм, для основных веществ − около 278 нм.Предел содержания поглощающих примесей может быть установлен по величинам отношений поглощения при различных максимумах (ФС на цианокобаламин, ретинола ацетат, токоферола ацетат).Количественное определение. Спектрофотометрия в УФ-области широко используется для количественного определения лекарственных средств и включена во все современные фармакопеи. Чувствительность метода определяется в основном способностью вещества к поглощению и выражается, как было указано выше, молярным коэффициентом поглощения. Предельные концентрации веществ, анализируемые при помощи спектрофотометрии, как правило, меньше, чем в титриметрических или гравиметрических методах. Этим объясняется использование спектрофотометрии при определении небольших количеств веществ, особенно в различных лекарственных формах.Основным условием для количественного анализа является соблюдение закона Бугера − Ламберта − Бера в пределах соответствующих концентраций. Для проверки соответствия закону строят график зависимости (поглощение − длина волны) или рассчитывают фактор для каждого стандартного раствора и определяют область концентраций, в пределах которой величина А/С остается постоянной.Существуют и применяются два принципиально различных способа спектрофотометрических количественных определений. По одному из них содержание вещества в процентах (х) рассчитывают на основании предварительно вычисленной величины поглощения, чаще по величине Е1% 1см(формула I):(I)где А – оптическая плотность;b – разведение;а – навеска, г.Примером может служить определение содержания кортизона ацетата в таблетках. Основным недостатком приведенного определения является общеизвестный факт: различные спектрофотометры (даже различные приборы одной и той же модели и одного производства) дают значительные отклонения по величине поглощения для одного и того же стандартного раствора. Более достоверные и воспроизводимые результаты обеспечивают сравнение поглощения испытуемого вещества с поглощением стандартного образца, определенного в тех же условиях. При этом учитываются многочисленные факторы, влияющие на спектрофотометрические измерения, например установка длины волны, ширина щели, поглощение кюветы и растворителя и др.Спектрофотометрическое количественное определение содержания лекарственного вещества при анализе индивидуальных веществ должно быть связано с применением специально приготовленного стандартного образца этого вещества.Стандартные образцы − это вещества, с которыми проводят сравнение испытуемых лекарственных средств при их анализе с использованием физико-химических методов. Эти образцы подразделяются на Государственные стандартные образцы (ГСО) и рабочие стандартные образцы (РСО).Выпуск ГСО осуществляют в соответствии с фармакопейной статьей. Фармакопейная статья на ГСО разрабатывается и пересматривается предприятиями (организациями), выпускающими или разрабатывающими лекарственные средства, согласовывается с Государственным научно-исследовательским институтом по стандартизации лекарственных средств и утверждается в установленном порядке.В качестве РСО используют образцы серийных лекарственных веществ, соответствующих требованиям фармакопейной статьи. При расчете количественного содержания определяемого вещества в лекарственной форме учитывают фактическое содержание данного вещества в РСО.Расчет количественного содержания индивидуального вещества в процентах (х) при использовании стандартного образца проводится по формуле (II):(II)где А1 – оптическая плотность испытуемого раствора;А0 – оптическая плотность раствора стандартного образца;С0 – концентрация раствора стандартного образца, г/мл;b – разведение;а – навеска, г.Содержание вещества в одной таблетке в граммах (х), считая на среднюю массу таблетки, рассчитывают по формуле (III) при использовании стандартного образца или по формуле (IV) – при использовании значения удельного показателя поглощения:(III)где q – средняя масса таблетки, г.(IV)Значения остальных символов см. формулу (I).Если количественные измерения выполняются достаточно часто, то можно вместо стандартного образца использовать подходящий калибровочный график, полученный для соответствующего стандартного образца. Таким графиком можно пользоваться, когда для испытуемого вещества поглощение пропорционально концентрации в пределах 75 − 125 % от окончательной концентрации, используемой в количественном определении.Такие калибровочные графики надо часто проверять и каждый раз готовить заново для нового прибора и новой серии реактивов.Пример использования метода УФ-спектрофотометрии для установления подлинности лекарственных средствВ настоящее время ведущие зарубежные фармакопеи для идентификации субстанций фторхинолонов обычно используют ИК-спектроскопию и ТСХ, за исключением субстанций норфлоксацина и офлоксацина, для которых USP в качестве дополнительного метода предлагает УФ-спектрофотометрию. Для препаратов метод ВЭЖХ и ИК-спектроскопия. Наличие сложной сопряженной системы в структуре фторхинолонов дает возможность широкого применения УФ-спектрофотометрии для их анализа по разделу нормативной документации "подлинность".Материалы и методы исследованияОбъекты исследования:Субстанции и стандартные образцы1.Норфлоксацин: стандартный образец, KRKA, Словения.2.Пефлоксацинаметансульфоната(мезилата)дигидрат: рабочий стандарт, Dr. Reddy’s Laboratories Ltd, Индия.3.Ципрофлоксацина гидрохлорида моногидрат: субстанция, Ranbaxy Laboratories Ltd, Индия.4.Ципрофлоксацин: стандартный образец, Bayer AG.5.Моксифлоксацинагидрохлорид: стандартный образец, Bayer AG.6.Офлоксацин: рабочий стандарт, Aventis Pharma Ltd, Франция.7.Левофлоксацина гемигидрат: рабочий стандарт, Aventis Pharma Ltd, Франция.8.Ломефлоксацина гидрохлорид: субстанция, Searle, Франция.9.Спарфлоксацин: рабочий стандарт, Dr. Reddy’s Laboratories Ltd, Индия.Таблетки Содержащие норфлоксацин: Нолицин, 400 мг, KRKA, Словения.Содержащие ципрофлоксацина гидрохлорид: Ципробай, Bayer AG, Германия.Подготовка проб для анализаИспытуемый раствор субстанции. 25 мг образца помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяли в достаточном количестве соответствующего растворителя и доводили объем раствора до метки. 2,0 мл полученного раствора помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводили объем раствора до метки тем же растворителем. Концентрация полученных растворов 5 мкг/мл.Раствор спарфлоксапина в воде12,5 мг образца помещали в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяли в достаточном количестве воды при нагревании при температуре 80°С в течение 25 мин. После охлаждения до комнатной температуры доводили объем раствора водой до метки. 5,0 мл полученного раствора помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводили объем раствора до метки тем же растворителем. Концентрация полученного раствора 5 мкг/мл.Испытуемый раствор таблеток. Одну таблетку взвешивали на аналитических весах и измельчали в агатовой ступке. Точную навеску порошка измельченной таблетки, эквивалентную содержанию 25 мг действующего вещества (норфлоксацина, пефлоксацина мезилата да 50 мл 0,01М раствора кислоты хлористоводородной и гидрата, ломефлоксацина гидрохлорида) помещали в интенсивно перемешивали в течение 25 мин. Доводили мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляли около объем раствора до метки тем же растворителем. 2,0 мл вещества (норфлоксацина, пефлоксацина мезилата дагидрата, ломефлоксацина гидрохлорида) помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляли около 50 мл 0,01М раствора кислоты хлористоводородной и интенсивно перемешивали в течение 25 мин. Таблица 2. Структурные формулы фторхинолоновМННСтруктурная формулаХимическое название, примечаниеНорфлоксацин4-Оксо-7-(1-пиперазинил)-6-фтор-1 -этил-1,4-дигидрохинолин-З -карбоновая кислота Фарм. субстанции: норфлоксацинПефлоксацин7-(4-Метил-1-пиперазинил)-4-оксо-6-фтор-1 -этил-1,4-дигидрохинолин-З -карбоновая кислота Фарм. субстанции: пефлоксацина метансульфоната (мезилата) дигидратЦипрофлоксацин4-Оксо-7-(1 -пиперазинил)-6-фтор-1 -циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислотаФарм. субстанции:ципрофлоксацинципрофлоксацина гидрохлоридамоногидратМоксифлоксацин7-[(8,8)-2,8-Диазабицикло[4.3.