Препараты лечебных и диагностических бактериофагов: общая характеристика, изготовление и практическое применение.

Цель курсовой работы – изучить общую характеристику, технологический процесс изготовления лечебных и диагностических препаратов бактериофагов и их применение.
Метод проведения работы – теоретическая работа по изучению общей характеристике, изготовлении и применении препаратов бактериофагов.
...

Бактериофаги вызывают лизис определенного вида бактерий, не угнетая нормальную микрофлору. Лечебно-профилактические препараты содержат поликлональные патогенные бактериофаги. Форма выпуска этих препаратов разнообразна: жидкая, в таблетках, в свечах, мазях. Препараты бактериофагов прописывают для применения внутрь, местно при повреждениях кожи и слизистых. Бактериофаги хорошо проникают в кровоток, лимфатическую систему, а удаляются из организма вместе с мочой. Активность лечебных бактериофагов во взаимоотношении с возбудителями гнойносептических и энтеральных заболеваний довольно высока – от 72 % до 90 %.[1,2]

Для лечения и профилактики ряда инфекционных заболеваний применяют вакцины, антибиотики и бактериофаги. Все более широкое применения в клинической практике находят препараты бактериофагов, так как у бактерий быстро развивается резистентность к антибиотикам и снижается их терапевтическое действие
Бактериофаги – это вирусы бактерии, которые вызывают их разрушение. Бактериофаги, действуют на определенные типы бактерий, вызывают их гибель, при этом не действуют на клетки организма человека и не нарушают нормальную микрофлору.
Цель курсовой работы – изучить общую характеристику, технологию изготовления лечебных и диагностических препаратов бактериофагов и их применение.

mirаbilis и Pr.vulgаris). Применяется для лечения и профилактики энтероколитов, для лечения кольпитов колипротейной этиологии и других заболеваний, вызванных коли и протейными бактериями (цистит, пиелит, пиелонефрит, эндометрит, сальпингоофорит, энтеральная патология). С профилактической целью препарат используют для обработки послеоперационных и свежеинфицированных ран, а также для профилактики внутрибольничных инфекций по эпидемическим показаниям. Выпускается во флаконах по 20 мл (в упаковке 4 или 10 флаконов) и 100 мл.2.6. Бактериофаг сальмонеллезныйБактериофаг сальмонеллезный групп А, В, С, Д, Е способен вызывать лизис сальмонелл и близких к ним по антигенной структуре бактерий. В основе препаратов – стерильный фильтрат фаголизатов наиболее распространенных сальмонелл: гр. А - паратифа А; гр. В - паратифа В, тифимуриум, гейдельберг, ньюпорт, холера суис, ораниенбург, инфантис; гр. Д - дублин, энтеритидис; гр. Е - анатум, ньюландс. Применяют при сальмонеллезе у детей и взрослых для лечения сальмонеллеза, санации реконвалесцентов (бактерионосительство), профилактика сальмонеллезов по эпидпоказаниям. Выпускается во флаконах по 100 мл; в таблетках (по 50 штук во флаконе или контурной ячейковой упаковке, в упаковке 10 флаконов или 5 контурных ячейковых упаковок); в таблетках по 25, 50 ил 100 штук во флаконах.2.7. Бактериофаг синегнойныйБактериофаг синегнойный обладает способностью специфически лизировать бактерии псевдомонас аэругиноза. Применяют для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний различных органов, вызванных синегнойной палочкой (заболевания уха, горла, носа, дыхательных путей и легких, хирургические, урогенитальные, энтеральные инфекции), а также дисбактериозов; с профилактической целью для обработки послеоперационных и свежеинфицированных ран, для профилактики внутрибольничных инфекций.Выпускается во флаконах по 20 мл (в упаковке 4 или 10 флаконов) и по 100 мл.2.8. Бактериофаг стафилококковыйБактериофаг Стафилофаг обладает способностью лизировать стафилококковые бактерии. Применяется для лечения и профилактики гнойных инфекций, стафилококковыми бактериями (ангина, фарингит, ларингит, трахеит, бронхит, пневмония, плеврит, гнойные раны, инфицированные ожоги, фурункул,), а также при дисбактериозе кишечника. Выпускается во флаконах по 20 мл (в упаковке 4, 8 или 10 флаконов) и по 100 мл[6]. 2.9. Бактериофаг стрептококковыйБактериофаг Стрептофаг обладает способностью лизировать стрептококковые бактерии. Применяется для лечения и профилактики гнойных инфекций, вызванных стрептококками (отит, ангина, фарингит, ларингит, трахеит, бронхит, пневмония, плеврит, нагноения ран, фурункул, уретрит, цистит), а также при дисбактериозе кишечника. Выпускается во флаконах по 20 мл (в упаковке 4 или 10 флаконов) и по 100 мл[4].2.10. Интести-бактериофагПредставляет собой смесь фильтратов фаголизатов, активных в отношении шигелл Флекснера 1, 2, 3, 4, 6 сероваров и Зонне; сальмонелл паратифа А, паратифа В, тифимуриум, холера суис, инфантис, ораниенбург, энтеритидис; энтеропатогенных кишечных палочек этиологически значимыхсеровариантов, энтерококков, стафилококков, псевдомонас аэругиноза, протея видов вульгарис и мирабилис. Применяют для лечения и профилактики заболеваний желудочно-кишечного тракта, вызванных чувствительными микроорганизмами: бактериальной дизентерии, сальмонеллеза, брюшного тифа, паратифа, дисбактериозов, энтероколита, колита, диспепсии. Выпускается во флаконах по 20 мл (4 или 10 флаконов в пачке) и по 100 мл.2.11. Пиобактериофаг комбинированный.Пиобактериофаг комбинированный (Пиополифаг) способен лизировать стафилококки, стрептококки (в т.ч. энтерококки), протея (мирабилис и вульгарис), синегнойную (псевдомонас аэругиноза) и кишечную палочки. Предназначен для профилактики и лечения гнойно-воспалительных заболеваний, хирургических инфекций, урогенитальных инфекций, гинекологических инфекций, энтеральных инфекций (гастроэнтероколит, холецистит, дисбактериоз), гнойно-септических заболеваний новорожденных. Выпускается во флаконах по 20 мл (4 или 10 флаконов в упаковке) и по 100 мл[6].Технология изготовления бактериофаговПроизводство жидких бактериофагов.Стадии: работа с производственными штаммами бактерийполучение маточных бактериофаговприготовление серии жидких бактериофаговконтроль препарата.Штаммы выделяют от больных и носителей. Бактерии должны быть в S- и O-формах, исключение шигеллы (R-,O-). Культура должна обладать типичными биохимическими, серологическими свойствами. Штаммы необходимо обновлять за счет свежевыделенных на различных территориях. Для наилучшего сохранения свойств штамма целесообразно после проверки высушить и хронить при 2-10оС.Бактериофаг выделяют из сточных и речных вод, проверяют набором соответствующих культур. Наиболее активные используют для приготовления маточных фагов. В производственных условиях применяются только апробированные штаммы бактериофагов и культуры соответствующих микробов, обладающих типичными морфологическими, биохимическими и серологическими свойствами. Штаммы бактериофагов должны быть музейными и рабочими. Музейные производственные штаммы бактериофагов ежегодно обновляются путем выделения новых или пассажами имеющихся штаммов бактериофага через организм больного, а также адаптацией к свежевыделенным, резистентным к данному бактериофагу культурам. Препарат бактериофага представляет собой фильтрат культуры соответствующих микроорганизмов, лизированных фагом. Он содержит большое количество размножившихся фагов, обладающих специфическими лизирующими свойствами[7].Получение бактериофага в настоящее время осуществляется в специальных аппаратах - реакторах, емкостью от 100 до 500л, с применением аэрации как фактора, стимулирующего развитие микроорганизмов. В реактор наливается жидкая питательная среда, например, бульон Мартена или Хоттингера для изготовления брюшнотифозного и дизентерийного бактериофагов с рН 7,2-7,6 и стерилизуется при температуре 110°С в течение 40 минут. После стерилизации среда охлаждается до 39°С и засеивается соответствующей микробной культурой и маточным бактериофагом одновременно. Для засева применяют 18-часовые агаровые культуры, которые прибавляются из расчета 50-150млн. микробных клеток на 1мл среды. Бактериофаг добавляется в количестве не более 0,3% по отношению к объему питательной среды. Среду с засеянными в ней культурой и бактериофагом оставляют при температуре 37°С на 6-18 часов. Бактериофаги активно размножаются внутри бактериальных клеток, увеличиваясь в количестве и вызывая их лизис, что внешне проявляется полным просветлением среды. К полученному лизату добавляется в качестве консерванта хинозол (0,01%) или фенол (0,25%) и не позже чем через 2часа после этого содержимое реактора фильтруется через бактериальные фильтры для удаления оставшихся микробных клеток. Полученный препарат-бактериофаг должен иметь вид, совершенно прозрачной жидкости желтого цвета. Он проходит контроль на стерильность, безвредность и литическую активность, т.е. вирулентность.3.2. Производство сухих бактериофагов.Для получения сухих препаратов жидкий фаголизат осаждается сульфатом аммонием в течение 6-18 часов при температуре 12оС, pH 7.0. Выпавший осадок отделяется от жидкой части, к сырой массе добавляется в качестве стабилизатора глюконат кальция (9%), если защитное покрытие пектин, то добавляют глюконат кальция 3%от массы. Смесь замораживается при - 30°С и высушивается под вакуумом. Размельчается и проводят контроль на стерильность, литическую активность Выпускается сухой фаг в виде таблеток, которые содержат стабилизированную субстанцию фаголизата, обычно применяемую таблеточную смесь (глюкозу, глюконат кальция, тальк, стеарин) и покрыты защитной кислотоустойчивой оболочкой из ацетилфталилцеллюлозы. Одна таблетка cyxогo бактериофага соответствует 20-25мл жидкого. Срок годности сухих фагов – 1 год[9].Изготовление свеч. Тщательно растертый концентрат 0,2гр на свечу смешивают с наполнителем полиэтиленоксид до однородной массы.3.3. Контроль препаратаСтерильность бактериофагов проверяют высевом на питательные среды и культивируют в термостатах при 370С. Препарат считают годным, если через 8сут во всех средах не обнаруживают рост микроорганизмов. При выявлении роста бактерий хотя бы в одной пробирке проводят повторный контроль из удвоенного количества образцов. При повторном проросте сред препарат бракуют. Безвредность препарата проверяют путем введения животным, например, брюшнотифозный и дизентерийный бактериофаги вводят подкожно трем мышам по 1мл, либо внутривенно одному кролику 5мл. Наблюдение за животными ведется в течение 3-4суток.