Простейшие внеклеточные эндопаразиты желудочно-кишечного тракта человека

Курсовая написана на кафедре общей биологии и биоэкологии МГОУ. Защищена на отлично в 2014 году.

Описаны методы лабораторной диагностики протозойных инвазий, морфологические характеристики основных паразитов.

Содержит иллюстрации. ...

Содержательное содержание.

К типу простейших (Protozoa) относится свыше 15000 видов животных, обитающих в морях, пресных водах, почве. Помимо свободноживущих форм, известно много паразитических, которые вызывают порой серьезные заболевания – протозоозы. В настоящее время известно около 50 видов простейших, возбудителей протозойных инвазий. С точки зрения патогенных биологических агентов простейшие являются объектом изучения паразитологии – комплексной биологической науки, изучающей явление паразитизма, биологию и экологию паразитов, а также вызываемые ими заболевания и меры борьбы с паразитами.
Морфологические характеристики всех классов простейших и их цист имеют как сходные (тело состоит из одной клетки, имеет размеры от 2 мкм до 1,5 мм), так и отличные друг от друга черты, что определяет методы диагностики прото зойных инвазий в повседневной практике. Патогенными свойствами для человека обладают 4 подгруппы простейших: Mastigophora (Жгутиковые), Rizopoda (Корненожки), Apicomplexa (Споровики), Ciliophora (Инфузории). Heliozoa (Солнечники) и Radiolaria (Лучевики) ведут свободный образ жизни в водных и почвенных биотопах.
В работе будут рассмотрены наиболее распространенные и, соответственно, эпидемиологически более значимые внеклеточные эндопаразиты ЖКТ человека (таблица 1).

Выделения кишечника при отторжении со дня язвы пораженной ткани; содержимое абсцесса.Малая вегетативная форма 13-20 мккмАмебоидная (круглая, овальная).Ядро пузырьковидное с ободком хроматина под оболочкой и центральной точечной кариосомой. Единичные вакуоли содержат включения (грибы, бактерии, элементы детрита), эритроциты не фагоцитирует. Движение активное, но более медленное, нежели у большой формы.Кал свежевыделен-ный, оформленный или полужидкий. Цистная форма8-15 мкмСферическая (округлая), реже овальная.В незрелой цисте 1-2 ядра, в зрелой – 4 ядра. В незрелах цистах содержатся хроматоидные тела. Ядра видны при окрашивании раствором Люголя.Не имеет.Кал оформленный.Dientamoeba fragilis - единственное из паразитирующих в кишечнике простейших, которое не образует цист. По таксономическим характеристикам она относится к типу Polymastigota, семейству Monocercomonadidae. Ранее D.fragilis включали в тип Rhizopoda, но на сегодняшний день достоверно известно, что эта амеба родственна другим паразитическим полимастиготам – трихомонадам – из-за преобладания двухъядерных особей и наличия жгутиков. Остается вопрос, каким образом трофозоиты выживают во внешней среде и передаются от человека к человеку. Есть предположения о том, что ведущий механизм передачи фекально-оральный. Отмечено, что вызванная Dientamoeba fragilis инфекция необычайно часто наблюдается у больных HYPERLINK "http://humbio.ru/humbio/infect_har/0046161b.htm" энтеробиозом. Можно предположить, что распространению Dientamoeba fragilis способствуют яйца или личинки остриц (Enterobius vermicularis). Симптомы инфекции, как правило, выражены незначительно. Отмечаются HYPERLINK "http://humbio.ru/humbio/infect_har/000c66f6.htm" периодический понос, HYPERLINK "http://humbio.ru/humbio/pronc/0002dd29.htm" боль в животе, HYPERLINK "http://humbio.ru/humbio/har_nevr/00216130.htm" потеря аппетита. Для постановки диагноза диентамебиаза необходимо выявить в кале трофозоитов. Поскольку они очень неустойчивы, то кал после сбора сразу же заливают консервантом Турдыева (80.0 мл 0,2-% раствора азотистокислого натрия (0,16 г NaNO2 + 80,0 мл дистиллированной воды), + 2,0 мл глицерина + 10 мл концентрированного формалина + 8,0 мл раствора Люголя). В случае с подозрением на инвазию Dientamoeba fragilis эффективен метод влажного мазка из консерванта. При достаточном количестве трофозоитов они выявляются в верхнем слое мазка непосредственно под покровным стеклом по эффекту негативной окраски раствором Люголя [Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов: Методические указания. – М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 1999. – с.72] Морфологические критерии диагностики диентамебы представлены в таблице 3.Таблица 3. Морфологические критерии диагностики Dientamoeba fragilisРазмеры Форма телаСодержимое цитоплазмыОрганеллы движенияМатериал для обнаруженияDientamoeba fragilis5-15 мкмАмебоидная, круглая. Цист не образует.Цитоплазма нежнозернистая, многочисленные вакуоли с фагоцитированными бактериями и детритом. Преобладают 2-х ядерные особи. Псевдоподии конусовидные, прозрачные. Редуцированные жгутики выявляются только при электронограммах. Кал свежевыделенный, жидкий Lamblia (Giardia) intestinalis – возбудитель лямблиоза. Простейшее относится к типу Polymastigota, классу Diplomonadea, отряду Diplomonadida, cемейству Hexamitidae. Лямблия существует в виде двух форм: вегетативная форма и цисты. Вегетативные формы обитают обычно в верхних отделах тонкого кишечника (двенадцатиперстная кишка и начальный отдел тощей кишки). Они размножаются только в просвете кишечника, прикрепляясь к поверхности слизистой оболочки при помощи присосок, но изредка могут проникать и в ткани стенки кишки. Вместе с содержимым кишечника вегетативные формы лямблий попадают в толстую кишку, где превращаются в цисты, и с испражнениями выходят во внешнюю среду.Источником инфекции является только человек, инвазированный лямблиями. Паразитирующие на грызунах (мыши, крысы) лямблии для человека не патогенны. Передача инфекции осуществляется фекально-оральным путем. Цисты лямблий выделяются с испражнениями и могут длительно сохраняться во внешней среде. Во влажном кале они сохраняются до 3 нед, а в воде - до 2 мес, они устойчивы к хлору (при концентрации 1 мг/л цисты погибают лишь через 72 ч). Заглатывание с водой от нескольких до 10 цист уже приводит к развитию инвазии у человека. Большинство эпидемических вспышек лямблиоза носит водный характер. Передача может осуществляться и через пищевые продукты, на которых цисты лямблий сохраняют жизнеспособность от 6 ч до 2 сут. Возможна и передача от человека к человеку. Этот путь инфицирования особенно широко распространен в детских дошкольных учреждениях, где инвазированность лямблиями значительно выше, чем среди взрослых. У мужчин-гомосексуалистов лямблиоз может передаваться половым путем.Распространенность лямблиоза зависит от состояния питания, водоснабжения и санитарно-гигиенических навыков населения. Среди детей инвазированность существенно выше и достигает 15-20%, среди взрослых в развитых странах инвазированность составляет 3-5%, а в развивающихся - свыше 10%. Лямблиоз отнесен к числу паразитарных болезней, имеющих наибольшее значение для общественного здравоохранения.У большей части больных лямблиоз протекает без каких-либо клинических проявлений (латентная форма); клинически выраженные заболевания протекают в виде острой и хронической форм. Инкубационный период продолжается до 1 до 3 нед. Заболевание начинается остро, у больного появляется жидкий водянистый стул без примесей слизи и крови. Стул неприятного запаха, на поверхности всплывают примеси жира. Появляются боли в эпигастральной области. Образуется большое количество газа, раздувающего кишечник, отмечается отрыжка газом с сероводородным запахом. Отмечаются снижение аппетита, тошнота, может быть рвота, у некоторых больных незначительно повышается температура тела.Острая стадия лямблиоза продолжается 5-7 дней. У отдельных больных лямблиоз может затянуться на месяцы и сопровождаться нарушением питания, снижением массы тела. У большей части проявления болезни исчезают самопроизвольно в течение 1-4 нед. Болезнь может переходить в хроническую форму, протекающую в виде рецидивов, периодически появляется вздутие живота, могут быть боли в эпигастральной области, иногда отмечается разжиженный стул. Хронические формы лямблиоза наблюдаются преимущественно у детей дошкольного возраста. В клинической симптоматике играет роль и непереносимость молочного сахара.Диагностическими критериями лямблиоза является обнаружение вегетативных форм в дуоденальном содержимом или в цист в оформленном кале. Для обоих форм L.intestinalis существуют определенные признаки, позволяющие дифференцировать их от других простейших кишечника (таблица 4).Таблица 4. Морфологические признаки Lamblia intestinalisРазмеры Форма телаСодержимое цитоплазмыОрганеллы движенияМатериал для обнаруженияВегетативная формаДлина 10-20 мкмШирина 5-15 мкмГрушевидная в спинно-брюшной проекции. Билатеральная симметрия. Ковшеобразная в боковой поверхности. Дорсальная сторона выпуклая, вентральная уплощена. В передней части тела с вентральной стороны имеется присасывательный диск. По средней линии тела спереди назад параллельно друг другу проходят 2 аксонемы. 2 ядра с крупной удлиненной кариосомой в передней части тела. 8 аксонем. 2 медианных тела располагаются поперек клетки ниже «присасывательного диска».4 пары жгутиков. Движение плавное, несколько раскаивающееся («падающий лист»).Дуоденальное содержимое (чаще первая порция); свежевыделенный кал, жидкий.Цистная форма (см. Приложение 1, рис 2)Длина 8-19 мкмШирина 7-10 мкмОвальная, эллипсоидная, реже круглая. Внутреннее тело на некотором протяжении отходит от оболочки. В незрелых цистах 2 ядра, в зрелых – 4, расположенные на одном из полюсов. Жгутиковый аппарат проходит по продольной оси тела. Не имеет.Кал оформленный, полужидкий.Желчь для исследования на наличие простейших должна быть доставлена в лабораторию сразу после зондирования. При подозрении на протозойную инвазию особенно тщательно исследуется порция «А» (порции «В» и «С» более информативны в отношении печеночных трематодозов). Наиболее эффективно исследование нативного препарата желчи и осадка, полученного после центрифугирования. В настоящее время разработаны методы обнаружения лямблиозных антигенов в испражнениях (РЭМА – реакция энзиммеченых антител, реакция непрямой иммунофлюоресценции), однако они не вошли в широкую практику, поэтому все еще актуальны рутинные методы лабораторной диагностики лямблий в кале – исследование каловой эмульсии с раствором Люголя и исследование осадка, полученного с применением системы Parasep. Cryptosporidium относится к подклассу Coccidia, отряду Eucoccidia, подотряду Eimeriina, семейству Cryptosporidiidae, которое включает около 20 видов криптоспоридий. Человек является хозяином одной криптоспоридий (С.parvum), однако строгой специфичности хозяев нет и заболевание человека может возникать от криптоспоридий, циркулирующих среди различных животных (телят, овец и пр.). Полное развитие паразита происходит в организме одного хозяина и завершается выделением с испражнениями ооцист, которые длительно сохраняются во внешней среде. При заглатывании ооцисты разрушаются в проксимальном отделе кишечника, при этом высвобождаются 4 червеобразных подвижных спорозоита. Они достигают энтероцитов, локализуясь около поверхности клеток, не проникая в цитоплазму, сформировавшиеся трофозоиты увеличиваются в размерах. Меронты 1-го типа способны к циклическому развитию (бесполое размножение) и число их значительно увеличивается. Меронты 2-го типа путем последовательных этапов полового цикла в конечном счете образуют ооцисту. Процесс споруляции у криптоспоридий происходит при внутриклеточной локализации ооцисты, и при выделении во внешнюю среду она оказывается способной заразить нового хозяина (при попадании в его пищеварительный тракт) . Процесс развития от попадания ооцисты в организм хозяина до выделения ооцист нового поколения во внешнюю среду длится 4-7 дней. Не все цисты выделяются во внешнюю среду, часть их с тонкими стенками могут вызвать аутоинвазию макроорганизма, обусловливая хроническое течение криптоспороидоза. Источником инфекции могут быть как человек, так и различные животные. Ооцистами человеческой криптоспоридии могут инфицироваться кошки, собаки, телята, овцы, козы, куры, крысы, мыши. С другой стороны, человек может инфицироваться ооцистами криптоспоридии, хозяевами которых являются телята (С. bovis), кошки (С. felis) и другие животные. Однако наибольшее значение имеет передача инфекции от человека к человеку, особенно при семейных и внутригоспитальных вспышках криптоспороидоза. Криптоспороидоз является довольно распространенным заболеванием. Наиболее восприимчивы к Cryptosporidium лица с иммунодефицитом. Эффективных препаратов для лечения криптоспороза нет.В плане лабораторной диагностики протозооза, вызываемого криптоспоридией, эффективен модифицированный метод окрашивания по Цилю-Нильсену мазков из осадка после обогащения консервированного материала [Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов: Методические указания. – М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 1999. – с.72]. Спорозоиты в ооцистах окрашиваются карболовым фуксином в малиновый цвет, что повышает выявляемость паразита. При микроскопическом исследовании окрашенного препарата ооцисты криптоспоридии можно распознать по характерным признакам, приведенным в таблице 5.Таблица 5. Морфологические характеристики Cryptosporidium parvumРазмеры Форма телаСодержимое цитоплазмыОрганеллы движенияМатериал для обнаруженияCryptosporidium parvum (см. Приложение 1, рис.3)3-5 мкмОкруглая. Зрелая ооциста имеет 4 спорозоита. Ооцисты могут быть двух типов: толстостенные (выделяются во внешнюю среду) и тонкостенные (из них спорозоиты высвобождаются внутри организма хозяина, что приводит к аутоинвазии).Не имеет.Кал свежевыделенный, жидкий, водянистый, оформленный.Изоспороз человека вызывается споровиками Isospora belli и Isospora hominis. Больше всего ему подвержены дети.