Рекомендуемая категория для самостоятельной подготовки:
Курсовая работа*
Код |
217103 |
Дата создания |
03 марта 2017 |
Страниц |
31
|
Мы сможем обработать ваш заказ (!) 19 декабря в 12:00 [мск] Файлы будут доступны для скачивания только после обработки заказа.
|
Описание
К данной rаботе есть prезентация, смотреть в моих работах с таким же названием. ...
Содержание
Оглавление.
Введение……………………………………………………….. 3.
1.Лекарственные средства……………………………………..4-6
2.Кульутра микроорганизмов………………………………...7-11
3.Методы микробиологического контроля………………….12-29
3.1Испытания на стерильность……………………………….12-18
3.2.Испытания на микробиологическую чистоту…………...19-25
3.3.Количесвенное определение микроорганизмов…………26
3.4.Выявление и идентификация семейств бактерий…………27-29
Заключение………………………………………………………30
Список литературы……………………………………………..
Введение
В современном мире фармацевтика занимает ведущие место в промышлености. Без лекарственных средств человечество не сможет долго существовать. Этому свидетельствуют исторические факты. Различные вспышки заболеваний, с которыми трудно было бороться, а с некоторыми из них и вообще невозможно было справиться без лекарственных средств. На протяжение многих тысячелетий человек создавал различные снадобья, сыворотки, порошки против различных недугов. В последствие, с развитием технологий, и с увеличением знаний в области фармакологии появились понятия лекарственные средства, включающие в себя вещества различного действия и агрегатного состояния . Но не все созданные лекарственные средства стерильны, и чтобы .....................................................
Фрагмент работы для ознакомления
Смешанные культуры могут быть приготовлены путем объединения чистых культур. Исследования, проводимые на смешанных культурах заданного состава, дают возможность понять, какими могут быть сложные формы взаимодействия микроорганизмов в местах их естественного обитания.3.Методы микробиологического контроля лекарственных средств. 3.1.Испытания на стерильность. Лекарственные средства для инъекций, глазные капли, мази, пленки, другие лекарственные средства, в отношении которых имеются соответствующие указания в нормативно - технической документации (НТД), должны быть стерильными. Стерильность лекарственных средств достигается соблюдением необходимых санитарно - гигиенических условий их изготовления и режима стерилизации. Отбор образцов для анализа. Образцы готовых лекарственных средств отбираютдля контроля от каждой серии в количествах, зависящих от вида стерилизации и числа единиц (ампул, флаконов и т.д.) в серии. В случае, если лекарственное средство стерилизуют насыщенным паром при избыточном давлении 0,11 +/- 0,02 МПа (1,1 +/- 0,2 кгс/кв. см) и температуре (121 +/- 1) град. С, образец состоит из 10 единиц. При других видах стерилизации минимальное количество образцов для анализа рассчитывают по формуле n = 0,4N n- число единиц в образце, а N - число единиц в исследуемой серии препарата, при этом n должно быть не менее 3 и не более 40. Определение антимикробного действия лекарственного средства. Во избежание неправильной оценки результатов анализа необходимо определить однократно для каждого наименования лекарственного средства, обладает ли оно антимикробным действием. Для этого в две пробирки с 10 мл тиогликолевой среды и в две - с 10 мл среды Сабуро добавляют соответствующее количество исследуемого лекарственного средства и вносят в каждую пробирку по 0,1 мл микробной взвеси соответствующего тест - штамма, содержащей 1000 клеток в 1 мл. Посевы в тиогликолевой среде инкубируют при температуре от 30 до 35 град. С в течение 48 ч, а на среде Сабуро - при температуре от 20 до 25 град. С в течение 72 ч. Контролем служат пробирки с питательными средами, в которые вместо данного лекарственного средства вносят аналогичное количество дистиллированной воды или соответствующего растворителя. Для проверки антибактериального действия лекарственных средств используют тест - микроорганизмы: Staphylococcus aureus АТСС 6538 Р, Bacillus subtilis ATCC 6633, Escherichia coli ATCC 25922, а противогрибкового действия - Candida albicans ATCC 885-653.При отсутствии антимикробного действия лекарственного средства в контрольных и опытных пробирках (колбах) должен наблюдаться рост перечисленных тест - микроорганизмов.При наличии антимикробного действия лекарственных средств используют соответствующие инактиваторы, указанные в частных фармакопейных статьях: (напр.: пара - аминобензойная кислота для сульфаниламидов, пенициллиназа - для пенициллинов и цефалоспоринов и т.д.). При отсутствии инактиватора препарат разводят, изменяя соотношение объемов посевного материала и питательной среды. Первоначально, не изменяя количества посевного материала, увеличивают объем питательной среды до 250 мл. Если при этом сохраняется антимикробное действие лекарственного средства, уменьшают объем посевного материала до 1 мл.В случае неэффективности разведения лекарственного средства используют метод мембранной фильтрации. Метод прямого посева. Испытуемый препарат, если необходимо, растворяют в соответствующем растворителе и высевают в определенных количествах. При испытании лекарственных средств посевы в тиогликолевой среде инкубируют при температуре от 30 до 35 град. С, а в среде Сабуро - от 20 до 25 град. С. Продолжительность инкубации посевов в обеих питательных средах составляет 14 сут. В случае помутнения питательной среды после внесения в нее испытуемого препарата следует в интервале от 3 до 7 сут. после посева сделать пересев на свежие аналогичные среды и инкубировать их при соответствующей температуре 14 сут от начала испытания.При испытании мазей и растворов лекарственных средств в маслах отбирают асептически по 0,1 г (мл) от каждой единицы и вносят в стерильную колбу вместимостью 250 мл, содержащую стеклянные бусы, 100 мл 1/15 мол фосфатного буферного раствора (рН 6,8-7,0) и эмульгатор. Перед проведением испытания содержимое колбы подогревают до температуры (41 +/-1) град. С. Колбу с испытуемым образцом встряхивают не более 30 мин до получения однородной эмульсии. Полученную эмульсию в количестве 5 мл переносят в колбу с 40 мл тиогликолевой среды и 5 мл - в колбу с 40 мл среды Сабуро. Посевы инкубируют 14 сут при соответствующей температуре для каждой питательной среды.Примечания. 1. Выбор эмульгатора и его количество зависят от природы мази и растворов лекарственных средств в маслах. Наиболее часто применяют твин-80 в концентрации до 2,5%, не оказывающей антимикробного действия.2. При испытании мазей, легко эмульгируемых в воде, эмульгатор не вносят в буферный раствор.3. При испытании мазей и растворов в маслах предпочтительнее использовать метод мембранной фильтрации.Метод мембранной фильтрации. При определении стерильности лекарственных средств, обладающих выраженным антимикробным действием, и лекарственных средств, разлитых в емкости более 100 мл, используют метод мембранной фильтрации.При испытании лекарственных средств с антимикробным действием от каждой серии независимо от ее объема отбирают 30 емкостей (ампул, флаконов и др.), которые делят на 3 группы по 10 емкостей. Емкости двух групп (20 штук) используют для испытания на стерильность, третьей группы (10 штук) - для контроля полноты отмывания мембраны от лекарственного средства. Испытание лекарственного средства на стерильность проводят с использованием фильтрационной установки, включающей фильтродержатель, соединенный с колбой - приемником. Фильтродержатель состоит из воронки с крышкой и основания из пористой пластины, на которую помещают мембрану. Используют мембраны с размером пор 0,45 +/-0,02 мкм, диаметром около 47 мм. Испытания проводят под вакуумом 93,3 кПа (70 см рт. ст.) при скорости вытекания воды 55-75 мл в 1 мин. Допускается использование аппарата, представляющего собой стерильную замкнутую систему и работающего также по принципу фильтрации растворов. Для фильтрации водных, масляных и спиртовых растворов рекомендуют использовать фильтры из эфиров целлюлозы или смесей эфиров целлюлозы. Фильтровальную установку в собранном виде стерилизуют насыщенным паром при избыточном давлении 0,11 +/- 0,02 МПа [(1,1 +/- 0,2) кгс/кв. см] и температуре (121 +/-1) град. С в течение 20 мин (температура и время критические). Стерилизацию можно осуществлять любым другим способом, обеспечивающим сохранность рабочих характеристик мембраны, а также стерильность мембраны и всей установки (ионизирующее излучение, окись этилена и т.п.).Испытуемое лекарственное средство растворяют или суспендируют (если в этом есть необходимость) в соответствующей стерильной жидкости и полученный раствор или суспензию пропускают через стерильную мембрану. Для растворения лекарственных средств с антимикробным действием и отмывания мембраны от них можно использовать любой растворитель, не подавляющий роста микроорганизмов, например, раствор натрия хлорида изотонического 0,9% для инъекций. Используемый растворитель перед стерилизацией необходимо профильтровать через мембраны с порами размером 0,45 +/-0,02 мкм для освобождения от механических примесей.Фильтрование отобранных образцов проводят в асептических условиях. Испытуемый раствор пропускают с помощью вакуума через одну или несколько мембран. При испытании лекарственных средств с антимикробным действием или содержащих консервант после окончания фильтрации мембрану необходимо промыть 3-5 порциями по 100 мл соответствующего растворителя, например растворам натрия хлорида изотонического 0,9% для инъекций или жидкости N 1 (см. с. 193), при испытании мазей - жидкости N 2 (см. с. 193). После отмывания мембраны ее извлекают, разрезают стерильными ножницами пополам и одну половину помещают в колбу со 100 мл тиогликолевой среды, вторую - в колбу со 100 мл среды Сабуро. Питательные среды с помещенными в них фильтрами выдерживают при температуре от 30 до 35 град. С (тиогликолевая среда) и от 20 до 25 град. С (среда Сабуро) в течение 7 суток при ежедневном просмотре.Для контроля стерильности растворов лекарственных средств, выпускаемых в виде порошков, лиофилизированных препаратов и пр., содержимое каждой емкости предварительно растворяют в стерильном растворителе. Затем из каждых 10 емкостей одной группы отбирают полученный раствор в количестве, соответствующем 200 мг лекарственного средства, и переносят в колбу, содержащую 100 мл аналогичного растворителя. Приготовленный раствор немедленно фильтруют. После отмывания фильтра, как указано выше, одну половину его помещают в колбу с тиогликолевой средой, вторую - в колбу со средой Сабуро.При испытании мазей и растворов лекарственных средств в маслах от каждой из 10 емкостей отбирают по 100 мг препарата в колбу со 100 мл растворителя (изопропилмиристат и др.), который предварительно подогревают до температуры не выше 45 град. С и стерилизуют фильтрованием через мембраны с размером пор (0,22 +/- 0,02) мкм. После фильтрации образца мембрану промывают двумя - тремя порциями по 200 мл жидкости N 2 и затем одной - двумя порциями жидкости N 1. Половину мембраны помещают в тиогликолевую среду, другую - в среду Сабуро, в которые предварительно вносят стерильный твин-80 из расчета 1 г на 1000 мл среды.При испытании лекарственных средств, разлитых в емкости большого объема, через фильтры пропускают содержимое 5-10 емкостей, если объем каждой емкости составляет от 100 до 500 мл. При наличии в емкости более 500 мл раствора на стерильность испытывают по 500 мл содержимого каждой из 5- 10 емкостей на 2-3 мембранах.При испытании лекарственных средств, представляющих собой вязкую жидкость или медленно фильтрующиеся суспензии, необходимо предварительно добавить растворитель, указанный в частной статье, для увеличения скорости фильтрации.Контроль полноты отмывания фильтра (третья группа емкостей) проводят следующим образом: при испытании антибактериального лекарственного средства в колбу с тиогликолевой средой и погруженной в нее половиной фильтра вносят суточную культуру Staphylococcus aureus ATCC 6538 Р, при испытании противогрибкового лекарственного средства - в колбу со средой Сабуро и фильтром вносят 48-часовую культуру Candida albicans ATCC 885-653 из расчета 100 микробных клеток на весь объем среды. Инкубацию проводят при соответствующих температурах. Наличие роста тест - микроорганизмов в контрольных колбах через 48-72 ч свидетельствует о достаточной полноте отмывания мембран от антимикробного лекарственного средства. Для контроля стерильности условий, в которых проводят испытания, необходимо фильтровать растворитель без испытуемого лекарственного средства с последующим воспроизведением всех вышеописанных операций.Учет и интерпретация результатов испытания на стерильность. Посевы просматривают в рассеянном свете ежедневно и по окончании периода инкубации. Наличие роста микроорганизмов в питательных средах оценивают визуально по появлению мутности, пленки, осадка и других макроскопических изменений. Выявленный рост микроорганизмов необходимо подтвердить микроскопированием мазков, окрашенных по Граму. Испытуемый препарат считают удовлетворяющим требованиям испытания на стерильность при отсутствии роста микроорганизмов. При обнаружении роста хотя бы в одной пробирке (колбе, флаконе) его подтверждают микроскопированием и повторяют испытание на таком же количестве образцов, как и в первый раз. При отсутствии роста микроорганизмов при повторном посеве испытуемый препарат считают удовлетворяющим требованию испытания на стерильность. В случае роста микроорганизмов при повторном посеве, морфологически сходных с микроорганизмами, выявленными в первичном посеве, испытуемый препарат считают нестерильным. Если при повторном посеве наблюдается рост микроорганизмов, отличающихся по морфологии от первоначально выделенных, испытание повторяют в третий раз на удвоенном количестве образцов. При отсутствии роста микроорганизмов после инкубации посевов в третьем испытании испытуемый препарат считают удовлетворяющим требованиям на стерильность. При наличии роста хотя бы в одной пробирке испытуемый препарат считают нестерильным.Питательные среды Для контроля стерильности применяют "Сухую питательную среду для контроля стерильности" (тиогликолевую) отечественного производства (ТУ 42.14 N 161-79) и среду Сабуро (жидкую). Вместо коммерческой тиогликолевой среды может быть использована тиогликолевая среда индивидуального приготовления.Состав и приготовление питательных сред. Тиогликолевая среда индивидуального приготовления: панкреатического гидролизата казеина 15,0 г дрожжевого экстракта (10%) 5,0 >> натрия хлорида 2,5 >> глюкозы 5,0 >> цистина (цистеина) 0,75 >> тиогликолевой кислоты или 0,3 мл тиогликолята натрия 0,5 г раствора резазурина натрия 1:1000 (свежеприготовленного) 1,0 мл агара 0,75 г воды дистиллированной до 1000 мл рН после стерилизации 7,0 +/- 0,2Тиогликолевую среду можно хранить в течение 14 сут со дня приготовления при температуре от 10 до 25 град. С в защищенном от света месте.В случае, если при хранении среды, содержащей резазурин, верхний слой среды (более 1/3 объема) окрасится в розовый цвет, среду можно регенерировать нагреванием на кипящей водяной бане в течение 10-15 мин до исчезновения розовой окраски с последующим быстрым охлаждением. В случае, если окраска не исчезает после нагревания, среду считают непригодной к употреблению. Регенерацию среды можно проводить только один раз.Среда Сабуро: пептона ферментативного 10 гглюкозы 40 >> воды дистиллированной до 1000 млрН после стерилизации 5,6 +/- 0,2Обе среды стерилизуют насыщенным паром при избыточном давлении 0,11 +/-0,02 МПа (1,1 +/-0,2 кгс/кв. см) и при температуре (121 +/-1) град. С в течение 15 мин. Жидкость N 1: пептона ферментативного 1 г воды дистиллированной до 1000 мл рН после стерилизации 7,1 +/-0,2Жидкость N 2:пептона ферментативного 5 г твина-80 10 гводы дистиллированной до 1000 млрН после стерилизации 7,1 +/-0,2Жидкости разливают в колбы по 100 мл и стерилизуют так же, как и питательные среды.Требования к ростовым свойствам питательных сред. Тиогликолевая среда и среда Сабуро должны обеспечивать визуально обнаруживаемый рост соответствующих тест - штаммов аэробных и анаэробных бактерий и грибов (предусмотренных НТД).Используемые питательные среды должны обеспечивать рост микроорганизмов при посеве их в количестве менее 100 жизнеспособных клеток: для тиогликолевой среды - не позднее 48 ч инкубации при температуре от 30 до 35 град. С и для среды Сабуро - не позднее 72 ч инкубации при температуре от 20 до 25 град. С.3.2. Испытания на микробиологическую чистоту. Необходимость проведения этого испытания вызвана тем, что лекарственные средства, в том числе выпускаемые в виде таких лекарственных форм, как таблетки, капсулы, гранулы, растворы, сиропы, мази, не стерилизуются в процессе производства. Поэтому они могут быть загрязнены микроорганизмами. Испытание включает количественное определение жизнеспособных бактерий и грибов и выявление некоторых видов микроорганизмов, представителей кишечной флоры и стафилококка, содержание которых недопустимо в нестерильных лекарственных средствах.Ниже представлена таблицы по нормам. Таблица 1. Микробиологическая чистота лекарственных средств.КатегорияПрименениеРекомендуемые нормы для Госфармакопеи XII издания1-Для парентерального введения-Глазные лекарственные средства-Для нанесения на открытые раны и ожоги-Другие лекарственные средства, к которым предъявляется требование "стерильность"Стерильность2-Для применения местно, трансдермально-Для применения (суммарно) - не более 102 интравагинально-Для введения в полости - Отсутствие бактерий уха, носа-Для введения в дыхательные пути (за исключением тех лекарственных средств, которые должны быть стерильными)-Общее число аэробных бактерий и грибов (суммарно) - не более 102 в 1 г или в 1 мл-Отсутствие бактерий семейства Enterobacteriace в 1 г или в 1 мл-Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1 г или в 1 мл-Отсутствие Staphylococcus aureus в 1 г или в 1 мл3А. Лекарственные средства из субстанций синтетического происхождении.Б. Лекарственные средства из субстанций природного происхождения (растительного, животного или минерального), за исключением лекарственных средств, включенных в Категорию В. Детские лекарственные средства-Общее число аэробных бактерий не более 103 в 1 г или в 1 мл-Общее число грибов - не более 102 в 1 г или 1 мл-Отсутствие Escherichia coli в 1 г или 1 мл-Общее число аэробных бактерий не более 104 в 1 г или в 1 мл-Общее число грибов - не более 102 в 1 г или в 1 мл-Отсутствие Escherichia coli в 1 г или в 1 мл -Отсутствие Salmonella в 10 г или в 10 мл-Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1г или в 1 мл-Отсутствие Staphylococcus aureus в 1г или в 1 мл-Энтеробактерий - не более 102 в 1 г или в 1мл-Общее число аэробных бактерий не более 500 в 1г или в 1мл-Общее число грибов - не более 50 в 1г или в 1мл-Отсутствие бактерий семейства Enterobacteriaceae в 1г или в 1мл-Отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1г или в 1мл-Отсутствие Staphylococcus aureus в 1г или в 1мл4Лекарственные средства, состоящие из одного вида сырья (фасованная продукция) или нескольких (сборы), а также растительное сырье "ангро"А. Лекарственные растительные средства или лекарственное сырье "ангро", применяемые в виде настоев и отваров, приготовленные с использованием термической обработкиБ. Лекарственные растительные средства или растительное сырье "ангро", применяемые без термической обработки-Общее число аэробных бактерий не более 107 в 1г или в 1мл-Общее число грибов - не более 105 в 1г или в 1мл-Escherichia coli - не более 102 в 1г или в 1мл-Общее число аэробных бактерий не более 105 в 1г или в 1мл-Общее число грибов - не более 104 в 1г или в 1мл-Отсутствие Escherichia coli - в 1г или в 1мл-Отсутствие Salmonella в 10 г или в 10 мл-Энтеробактерий - не более 103 в 1г или в 1млТаблица 2. Микробиологическая чистота субстанций и вспомогательных материалов для производства лекарственных средств.КатегорияПрименениеРекомендуемые нормы для Госфармакопеи XII издания1.2 2.2 3.2 4.2Субстанции для производства:Стерильных лекарственных средствНестерильных лекарственных средств, относящихся к Категории 2 Нестерилъных лекарственных средств, относящихся к Категории 3В Субстанции синтетического происхождения для производства нестерильных лекарственных средств Субстанции природного происхождения (растительного, животного или минерального) Вспомогательные материалы (мука пшеничная, крахмал, тальк и т.д.
Список литературы
Список литературы.
1. Брокгауза и Ефрона Лекарства // Энциклопедический словарь: В 86 томах (82 т. и 4 доп.). — СПб., 1890—1907.
2. Прозоркина Н.В. , Рубашкина Л.А. Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии. — Ростов-на-Дону:"Феникс", 2002. — С. 135.
3. К.Д.Пяткин Микробиология с вирусологией и иммунологией. — М:"Медицина", 1971. — С. 84.
4. Л.Б.Борисов Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. — Медицина, 1992. — С. 44.
5. Машковский М.Д., Бабаян Э.А., Общие методы анализа Лекарственное растительное сырье одиннадцатое издание выпуск 2.-М, 1900.-с.453
6. Статья Государственной фармакопеи от 25.06.2003 № 295-22/124 - (ред. от 01.01.2002) "Методы микробиологического контроля лекарственных средств".
Пожалуйста, внимательно изучайте содержание и фрагменты работы. Деньги за приобретённые готовые работы по причине несоответствия данной работы вашим требованиям или её уникальности не возвращаются.
* Категория работы носит оценочный характер в соответствии с качественными и количественными параметрами предоставляемого материала. Данный материал ни целиком, ни любая из его частей не является готовым научным трудом, выпускной квалификационной работой, научным докладом или иной работой, предусмотренной государственной системой научной аттестации или необходимой для прохождения промежуточной или итоговой аттестации. Данный материал представляет собой субъективный результат обработки, структурирования и форматирования собранной его автором информации и предназначен, прежде всего, для использования в качестве источника для самостоятельной подготовки работы указанной тематики.
bmt: 0.00492