| Код | 196083 | ||
| Дата создания | 2017 | ||
| Страниц | 51 ( 14 шрифт, полуторный интервал ) | ||
| Источников | 29 | ||
| Изображений | 15 | ||
|
Файлы
|
|||
|
Без ожидания: файлы доступны для скачивания сразу после оплаты.
Ручная проверка: файлы открываются и полностью соответствуют описанию. Документ оформлен в соответствии с требованиями ГОСТ.
|
|||
В настоящее время высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) как метод анализа лекарственных веществ (ЛВ) и лекарственных средств (ЛС) включена в различные фармакопеи – ГФ XII издания, фармакопею США, Европейскую, Британскую, Японскую и др. [1, 2]. Это обусловлено высокой точностью, надежностью и универсальностью метода: ВЭЖХ по своим характеристикам соответствует требованиям количественного анализа около 80-90% препаратов [3]. Метод широко используется: для контроля качества сырья [4, 5] и продукции [6, 7], количественного определения действующих веществ и примесей [6, 8, 9], при мониторинге концентрации ЛВ в крови пациентов и при оценке биоэквивалентности [7, 10]. Эффективно применение ВЭЖХ и в процессе разработки ЛС для количественного и качественного анализа [11].
ВЭЖХ стала новым этапом в развитии жидкостной хроматографии и возникла как результат появления новых высокоэффективных сорбентов. Сейчас, на новом этапе научно-технического прогресса развитием метода высокоэффективной хроматографии стала сверхпроизводительная высокоэффективная (сверхэффективная) жидкостная хроматография (СВЭЖХ), которая характеризуется увеличением эффективности хроматографического разделения за счет применения хроматографических сорбентов с размером частиц менее 3 мм. Применение частиц столь малых размеров приводит к увеличению эффективности и разрешения между пиками, чувствительности (за счет сужения пиков), пиковой емкости, что в результате позволяет проводить большее число исследований в единицу времени в сравнении с ВЭЖХ [2].
Проведенный анализ литературных данных показывает, что произошедшие в последнее время изменения в фармацевтической отрасли России, направленные на модернизацию производств, интенсифицировали внедрение ВЭЖХ в аналитические исследования на всех стадиях разработки, производства и сопровождения до потребителя ЛС.
Все более широкое применение метода обосновывает актуальность и необходимость изучения метода ВЭЖХ в области анализа фармацевтических субстанций. Ведь для получения надежных результатов необходимо правильно провести пробоподготовку, выбрать оптимальный элюент и способ детектирования, а зачастую и разработать методику проведения анализа, что определяется строением и свойствами анализируемых веществ.
Цель работы – изучить возможности метода высокоэффективной жидкостной хроматографии и особенности его использования в фармацевтическом анализе.
Поставленная цель определила задачи исследования:
Выполнение работы будет способствовать теоретической подготовке в рассматриваемой области и повышению научного уровня и будущей квалификации исполнителя.
1.1 Общие сведения. Классификация
Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) был разработан и внедрен в конце прошлого столетия [12].
Жидкостная хроматография (ЖХ) является оптимальным методом анализа химически и термически нестойких молекул, высокомолекулярных веществ с пониженной летучестью и представляет собой логическое развитие газовой хроматографии. Подвижная фаза в ЖХ (элюент) выполняет не только транспортную функцию, обеспечивая перенос десорбированных молекул по колонке. Она регулирует также константы равновесия, а, следовательно, и удерживание при взаимодействии с неподвижной фазой (за счет сорбции на поверхности) и с молекулами разделяемых веществ. Кроме того, ЖХ разделение обычно происходит при температурах, близких к комнатной, что зачастую является определяющим фактором при выборе метода исследования.
...
1.2 Основные величины жидкостной хроматографии
Чаще всего используют проявительный вариант, при котором в колонку в потоке элюента вводят порцию разделяемой смеси, а выход компонентов из колонки регистрируется на хроматограмме в виде пиков (рис. 5) и определяют:
...
2.1 Обращенно-фазовая ВЭЖХ
В обращенно-фазовой хроматографии неподвижная фаза – неполярная; ПФ – полярная. Наименьшей элюирующей способностью характеризуется вода, а для повышения элюирующей способности в ПФ вводят ацетонитрил, метанол и другие растворители, с увеличением содержания которых элюирующая способность подвижной фазы повышается. При этом подвижная фаза должна:
...
2.2 Аппаратура ВЭЖХ
Система для проведения разделения методом ВЭЖХ состоит из нескольких блоков: насоса, дозатора, колонки, детектора и регистрирующего устройства. Основные виды детекторов, их характеристики приведены в Приложении В.
Наиболее распространенным детектором в адсорбционной ВЭЖХ является спектрофотометрический [2, 15]. В процессе элюирования веществ в специально сконструированной микрокювете измеряется оптическая плотность элюата при заранее выбранной длине волны, соответствующей максимуму поглощения определяемых веществ. Такие детекторы измеряют поглощение света в ультрафиолетовой или видимой области спектра.
...
2.3 Особенности практического применения метода ВЭЖХ
С развитием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) расширились возможности хроматографии в исследовании и анализе природных макромолекул и биополимеров и, как следствие, применения ее в медицинской практике для фармацевтического анализа лекарственных средств на всех этапах производства, для прогнозирования и диагностики заболеваний, а также для биохимических исследований.
Так, применение метода ВЭЖХ в определении ЛВ в плазме при проведении исследований биоэквивалентности и клиническом мониторинге описывается авторами [2]. В работе рассмотрены способы пробоподготовки, хроматографирования и детектирования. Показано, что ВЭЖХ широко используется в анализе лекарственных веществ (ЛВ) и лекарственных средств (ЛС):
...
2.4 Анализ лекарственных средств методом ВЭЖХ
При синтетических исследованиях, отработке технологических режимов, а также в ходе производства для постадийного контроля требуется выполнение анализа многокомпонентной реакционной смеси. При этом использование ВЭЖХ позволяет одновременно определять все компоненты с высокой точностью, повысить скорость анализа, разделять близкородные соединения.
...
Таблица 1 – Условия ВЭЖХ при постадийном контроле синтеза 11-дезоксипростагландина Е1α
...
Таблица 2 - Результаты количественного определения компонентов в бициллине-3
...
3 Теоретическое обоснование механизма разделения в ВЭЖХ
Наиболее удачными и распространенными объяснениями механизма разделения в ВЭЖХ ОХ являются теория, использующая представления о параметрах растворимости Гильдебранта, и сольвофобная теория Хорвата-Меландера [12]. По теории, основанной на параметрах растворимости Гильдебранта, удерживание определяется молекулярными взаимодействиями разделяемых веществ с подвижной и неподвижной фазой. Зависимость фактора емкости вещества от состава подвижной фазы описывается уравнением
...
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В настоящей работе рассмотрен метод высокоэффективной жидкостной хроматографии и его применение для фармацевтического анализа. Показано, что ВЭЖХ отличается от классического варианта колонками меньшего диаметром, меньшим размером частиц сорбента, применением давления до 3107 Па для прокачивания элюента через колонку.
Рассмотрены основные теоретические положения метода ВЭЖХ, основные особенности каждого из вариантов ее осуществления в зависимости от механизма удерживания разделяемых веществ неподвижной фазой. Описаны основные виды и характеристики хроматограмм; основные виды оборудования. Более подробно рассмотрены типы применяемых детекторов.
...
ПРИЛОЖЕНИЕ А
Свойства растворителей для ВЭЖХ
...
ПРИЛОЖЕНИЕ Б
Сорбенты для обращено-фазовой ВЭЖХ
...
ПРИЛОЖЕНИЕ В
Детекторы для высокоэффективной жидкостной хроматографии
...
ПРИЛОЖЕНИЕ Г
Условия проведения ВЭЖХ некоторых лекарственных средств
...
ПРИЛОЖЕНИЕ Д
Выбор условий ВЭЖХ с учетом гидрофобности разделяемых веществ
...