Вход

Скрининг новых антибиотикорезистентных штаммов лактобацилл.

Рекомендуемая категория для самостоятельной подготовки:
Реферат*
Код 69583
Дата создания 2013
Страниц 22
Источников 17
Мы сможем обработать ваш заказ 24 января в 12:00 [мск]
Файлы будут доступны для скачивания только после обработки заказа.
1 440руб.
КУПИТЬ

Содержание

Содержание
1)Понятие об АБ (антибиотик). Механизмы АБ-резистентности у бактерий (особенно у лактобацилл). 3
2)Методы определения чувствительности микроорганизмов к АБ 15
Список литературы 21

Фрагмент работы для ознакомления

Например,  для  определения  МИК  тетрациклина  в  отношении  культуры Staphylococcus aureus , выделенной от больного,  готовят двукратно убывающие концентрации этого антибиотика в стандартном питательном  бульоне (Бульон  Мюллера-Хинтона).  Контролями  культуры  и  антибиотика  являются, соответственно, бульон без антибиотика и бульон с первым разведением антибиотика. В опытные и контрольные пробирки вносят стандартизованную суспензию молодой агаровой культуры  S. aureus и после суточной инкубации учитывают результат. Учетным признаком является наличие или отсутствие мутности бульона (роста культуры) в пробирках[4]. В  контроле культуры должна быть мутность, в контроле антибиотика - нет. Величина МИК соответствует той минимальной концентрации тетрациклина, при которой отсутствует мутность (бульон в пробирке прозрачен). Серийные  разведения  в  плотных  средах (Агар  Мюллера-Хинтона,  М173)  чаще  используют  для одновременного тестирования большого количества микробных штаммов (для посева можно использовать специальный штамп-репликатор). Учетным признаком в этом случае является наличие или отсутствие роста на поверхности агара. Метод серийных разведений нередко считают наиболее точным, хотя и относительно трудоемким,  дорогим. В действительности, при правильной постановке и соответствующих контролях диффузионные методы в ряде случаев не уступают ему по точности. Вместе с тем методом серийных разведений можно тестировать чувствительность более широкого круга микроорганизмов (включая анаэробные, медленно-растущие и прихотливые).Диско-диффузионный метод При определении чувствительности методом диффузии в агар чистую культуру возбудителя засевают «газоном» на питательный агар в чашке, например, тампоном, смоченном в стандартизованной (108 КОЕ/мл) суспензии  микроорганизма.  Затем  на  поверхность  агара  укладывают  стандартные  бумажные  диски, пропитанные антибиотиками, которые диффундируют в агар, создавая градиент концентрации. На чашку диаметром 90 мм равномерно укладывают 6-7 дисков. После инкубирования в термостате измеряют диаметры  зон  задержки  роста  вокруг  дисков  и  по  специальным  таблицам  определяют  степень чувствительности к тому или иному антибиотику (рис. 4). Рис. 4.  Определение  антибиотикочувствительности диско-диффузионным методомСуществует линейная связь между логарифмом МИК, измеренной при использовании метода серийных разведений, и диаметром зоны задержки роста при использовании диско-диффузионного метода (рис. 5). Рис. 5. Графическое изображение взаимосвязи между Iog2 МИК и диаметром зоны задержки роста, полученным с помощью диско-диффузионного метода при  использовании  дисков, содержащих  аналогичную  концентрацию антибиотикаПоскольку для получения результатов методом диффузии в агаре используют стандартизованные условия (состав и количество среды, количество засеваемых микробов, температура и сроки инкубирования, стандартные диски и др.), каждому значению диаметра зоны вокруг диска с антибиотиком соответствует определенное значение МИК. Исходя из значения МИК, можно определить терапевтический индекс: Т=МИК/К (см. выше).  Следовательно, по диаметру зоны можно определить степень чувствительности к тому или иному антибиотику: чувствительные (S), умеренно-устойчивые (I) и устойчивые (R). К  категории S (от англ. sensitive, чувствительный) относят те, для которых использование средних терапевтических доз будет достаточным для трехкратного превышения МИК.  В  категорию I (от англ. intermediate, промежуточный) относят те микробы, для подавления которых потребуются максимальные терапевтические дозы. Категорию R (от англ.  resistant, устойчивый) составляют те микроорганизмы, в отношении которых данный антибиотик будет неэффективным in vivo (см. выше). Таким образом, определение антибиотико-чувствительности методом серийных разведений и диско- диффузионным методом основаны на одном принципе - сравнении величины МИК для данного микроба со средней концентрацией антибиотика в сыворотке   крови. Различие в том, что в первом случае МИК  определяют непосредственно в опыте, а во втором случае определяют величину зоны задержки роста, как эквивалент  МИК,  поэтому  цепочка  расчетов  несколько  длиннее:  диаметр-МИК-Т-категория чувствительности. Диско-диффузионный метод более прост, дешев и гибок в работе, хотя и имеет свои ограничения[7. 12]. Другие методы Промежуточное положение между двумя вышеописанными методами занимает метод определения чувствительности  с  помощью  Е-тестов (E-test).  Последние  представляют  собой  бумажные  полоски, пропитанные не одной, а рядом убывающих концентраций определенного антибиотика (128, 64, 32, 16, 8, 4, ...мкг/мл).  Е-тесты,  подобно  дискам  при  диско-диффузионном  методе,  укладывают  на  поверхность стандартного  питательного  агара,  засеянного  испытуемой  культурой  в  виде «газона».  В  результате диффузии антибиотик формирует в агаре эллипсовидную зону градиента концентраций: более широкую в области высоких концентраций и более узкую — в области  низких. После инкубирования вокруг полоски формируется эллипсовидная зона задержки роста, которая, сужается в области малых концентраций и «пересекает» полоску на уровне, соответствующем величине МИК (рис. 6). Тот же принцип используется при определении чувствительности методом стрипов ХайКомб.   Рис. 6. Схема постановки Е-теста (стрелкой показано место пересечения зоны задержки  роста с полоской; значение МИК антибиотика – 1,0 мкг/мл).При массовых исследованиях используют автоматизированные методы определения чувствительности к антибиотикам. Это позволяет упростить и ускорить проведение исследования. Наиболее часто применяют метод серийных разведений в планшетах и метод пограничных концентраций (микрометоды)[11]. Список литературыИ.М.Абдуллин Антибиотики в клинической практике, Саламат, 1997 Катцунга Б.Г Базисная и клиническая фармакология, Бином;СПб.:Нев.Диалект, 2000.Альберт А. Избирательная токсичность. Физико-химические основы терапии: в двух томах / Пер. с англ. М.: Медицина, 1989.Альбертс Б., Брей Д., Льюис Дж. с соавт. Молекулярная биология клетки: в двух томах. М.: Мир, 1994.Белоусов Ю.Б., Моисеев В.С., Лепахин В.К. Клиническая фармакология и фармакотерапия. Руководство для врачей. М.: Универсум Паблишинг, 1997.Гаузе Г.Ф. Молекулярные основы действия антибиотиков. /Пер. с англ. М.: “Мир", 1975.Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках. М.: Высшая школа, 1986.Елинов Н.П. Химическая микробиология. М.: Высшая школа, 1989.М.Д. Машковский. Лекарственные средства. М., 1993, т.1, с.313-314.Материалы научно-практической конференции “Антибактериальные препараты в практике терапевта". СПб., 16-17 мая 2000.Михайлов И.Б. Клиническая фармакология. СПб.: Фолиант, 1999.Страчунский Л.С., Козлов С.Н. Антибиотики: клиническая фармакология. Смоленск: Амипресс, 1994.Яковлев В.П. Антибактериальная химиотерапия в неинфекционной клинике: новые беталактамы, монобактамы и хинолоны. // Итоги науки и техники. Москва, 1992, 201 стр.Tavakoli N., Comanducci A., Dodd H.M. et al. IS1294, a DNA element that transposes by RC transposition // Plasmid. — 2000. — V. 44, № 1. — P. 66–84. Toleman M.A., Bennett P.M., Walsh T. Common regions e.g. orf513 and antibiotic resistance: IS91-like elements evolving complex class 1 integrons // J. Antimicrob. Chemother. — 2006. — V. 58. — P. 1–6. Woods J.B. Antimicrobials for biological warfare agents // Biological weapons defense. N.J., — 2005. — P. 285–315. Yim G., Wang H.H. Davies J. Antibiotics as signaling molecules // Phil. Trans. R. Soc. B. — 2007. — V. 362. — P. 1195–1200.

Список литературы [ всего 17]

Содержание
1)Понятие об АБ (антибиотик). Механизмы АБ-резистентности у бактерий (особенно у лактобацилл). 3
2)Методы определения чувствительности микроорганизмов к АБ 15
Список литературы 21
Пожалуйста, внимательно изучайте содержание и фрагменты работы. Деньги за приобретённые готовые работы по причине несоответствия данной работы вашим требованиям или её уникальности не возвращаются.
* Категория работы носит оценочный характер в соответствии с качественными и количественными параметрами предоставляемого материала. Данный материал ни целиком, ни любая из его частей не является готовым научным трудом, выпускной квалификационной работой, научным докладом или иной работой, предусмотренной государственной системой научной аттестации или необходимой для прохождения промежуточной или итоговой аттестации. Данный материал представляет собой субъективный результат обработки, структурирования и форматирования собранной его автором информации и предназначен, прежде всего, для использования в качестве источника для самостоятельной подготовки работы указанной тематики.
© Рефератбанк, 2002 - 2022