Спектрофотометрическое определение кверцетина и (+) -катехина в водно - этанольных растворах при совместном присутствии

Введение
Глава 1. Обзор литературы……………………………………………..…….5
1.1 Классификация и физико-химические свойства фенольных соединений………………………………………………………………………...5
1.2 Методы выделения и анализа флавоноидных соединений………...12
1.2.1 Методы выделения флавоноидных соединений………..….12
1.2.2 Методы анализа флавоноидных соединений……………....12
1.2.2.1 УФ-спектроскопия флавоноидных соединений………….13
Глава 2. Объекты и методы исследования………………………………...16
2.1 Объекты исследования …………………………….……………...…16
2.1.1 Кверцетин………………….……………………………..…..16
2.1.2 (+)-катехин………………………………...……...……….….17
2.2 Методика эксперимента………..………………………….…...……17
2.2.1 Методика спектрофотометрического определения кверцетина и (+)-катехина………………………..…….….…...….17
Глава 3. Обсуждение результатов………………….……………………....20
Выводы…………………………………………………………………….…27
Список используемой литературы…………………………………...…..28

3. Спектрофотометрическое определение кверцетина и (+)-катехина при добавке хлорида алюминия.
4. Выбор оптимальной длины волны для определения кверцетина методом УФ-спектрофотометрии.
5. Количественное определение кверцетина и (+)-катехина в смеси методами: Фирордта и молярных коэффициентов светопоглощения.
6. Выбор оптимального соотношения концентраций кверцетина и (+)-катехина для их количественного определения при совместном присутствии.
Глава 1. Обзор литературы
1.1 Классификация и физико-химические свойства фенольных соединений
Флавоноиды - группа природных биологически активных соединений - производных бензо--пирона, в основе которых лежит фенилпропановый скелет, состоящий из С6 -С3 -С6 углеродных единиц. Это гетероциклические соединения с атомом кислорода в кольце [4].
...

1.2.1 Методы выделения флавоноидных соединений
Флавоноиды содержатся во всех частях растения, и метод выделения их зависит от характера растительного материала и типа флавоноида, который необходимо выделить. Лучше всего экстракции подвергается воздушно-сухое сырье. Если же обрабатывается свежесобранное сырье, то его помещают в кипящий растворитель, чтобы прекратить действие ферментов, которые могут вызвать гидролиз гликозидов.
Выбор растворителя для экстракции, как правило, зависит от полярности флавоноида. Более полярные растворители употребляются для экстракции гликозидов и антоцианов, менее полярные – для агликонов. Для предварительной очистки флавоноидов применяют диализ.
При выделении индивидуальных соединений широко используется колоночная хроматография. Используются следующие адсорбенты: силикагель, магнезол, целлюлоза, окись алюминия, полиамид, сефадекс, ионообменные смолы, активированный уголь для разделения и очистки самых разных флавоноидов.
...

1.2.2.1 УФ-спектроскопия флавоноидных соединений
Данные по УФ-спектроскопии флавоноидных соединений широко представлены в литературе и позволяют получить солидную информацию об их строении.
Для основных классов флавоноидов определены максимумы поглощения (таблица 1).
Таблица 1.
Абсорбционные максимумы некоторых флавоноидов в УФ- и видимой областях спектра
Подкласс флавоноидного соединения
Формула соединения
Абсорбционный максимум
Флавоны

250-280,
310-350
Флавонолы

250-280,
350-385
Флаваноны

275-295,
310-330
Халконы

240-260,
365-390

Расстояние между основными максимумами коротко- и длинноволновой части спектра более или менее постоянно и может служить отличительным признаком. Имеет значение и соотношение интенсивности полос.
Наличие гидроксильных групп вызывает батохромный сдвиг максимумов в длинноволновой области спектра, а метилирование, ацетилирование и гликозидирование – гипсохромный сдвиг обоих максимумов.
...

2.1 Объекты исследования
2.1.1 Кверцетин
Флавонолы отличаются от флавонов наличием ОН-группы в
С3-положении.
Наиболее распространен среди флавоноловых агликонов кверцетин (рис.11), кемпферол, галангин, изиальпинин, встречающийся часто в виде гликозидов кверцетина и рутина.

Рис.11
С15Н10О7
7,5,3,3',4' – пентаоксифлавон (IUPAC)

Молекулярная масса Мr = 302,24 г/моль [11]. Кверцетин представлен в виде лимонно-желтых кристаллов; т. пл. 310°С; слабо растворимы в воде (0,35%), растворим в диэтиловом эфире, этаноле, хлороформе, СН3СООН и щелочах [12].
2.1.2. (+)-катехин
Представитель катехинов. Имеет структурную формулу:

Бесцветное соединение состава С15Н11О6, с т.пл. 174-175°С, молекулярной массой 290 г/моль, слабо растворимо в воде, растворимо в диэтиловом эфире, этаноле, СН3СООН и щелочах.
Содержится во многих растениях (особенно богаты листья чая, виноградной лозы, бобы какао) [12].

2.2 Методика эксперимента

2.2.
...

R1=OH; R2=H – Кверцетин
R1=OCH3; R2=H – Изорамнетин
R1=R2=OH – Мирицетин

Рис. 9
Для флавонолов характерно существование большого разнообразия метоксилированных производных. Основное количество обнаруженных флавонолов является гликозидами. Широко распространены ацилированные флавонолгликозиды.
Одним из наиболее известных и широко распространенных флавонолгликозидов является рутин (3-рутинозид кверцетина). Это флавоноид находит применение в медицине, входя в состав укрепляющих капилляры препаратов.
Ауроны
Представляют собой ярко-желтые пигменты, приобретающие в парах аммиака интенсивную оранжевую окраску. К наиболее часто встречающимся в растениях ауронам принадлежат сульфуретин, ауреузидин, и брактеатин (рис.10) [4]. Рис.10

R1=R2=R3=H – Сульфуретин
R1=OH; R2=R3=H - Ауреузедин
R1=R3=H; R2=OH – Брактеатин

1.2 Методы выделения и анализа флавоноидных соединений
1.2.
...