Апирогенность растворов для инъекций.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
ПИРОГЕННЫЕ ВЕЩЕСТВА И ИХ СВОЙСТВА
СПОСОБЫ ДЕПИРОГЕНИЗАЦИИ ВОДЫ, РАСТВОРОВ, ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ
МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ПИРОГЕННЫХ ВЕЩЕСТВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Апирогенность растворов для инъекций.

Химический способ. Более пригоден для стерилизации свето­непроницаемых веществ (бактерицидное действие реализуется лишь на глубине 1 мм). Наиболее часто его используют для обра­ботки упаковочного материала и технологической воды. Возможна обработка УФ-лучами формообразующих веществ (крахмала, таль­ка, сахара) в дисперсном состоянии (при перемешивании).
Ионизирующее излучение. Наиболее перспективный способ деконтминации сырья и готовых лекарственных форм. Ионизи­рующее излучение обладает высокой проникающей способностью. При облучении не образуются канцерогенные, мутагенные, токсич­ные вещества, сохраняются физико-химические и биологические свойства обрабатываемых лекарств. Метод используют для обра­ботки антибиотиков, витаминов, ферментов, гормонов и алкалои­дов.
Наиболее рациональные точки контроля при изготовлении парентеральных лекарственных средств следующие1:
- контроль сырья, контроль воды для инъекций;
- проверка элементов фильтра на вымывание из них пирогенов;
- контроль растворов перед стерилизующим фильтрованием;
- контроль чистоты ампул, флаконов.
Основными источниками пирогенных веществ в воде для инъекций являются системы умягчения воды, деионизации и угольный фильтр, которые требуют наиболее пристального внимания, частой регенерации, очистке и т.п.
Эндотоксины – липополисахариды, входящие в состав клеточной мембраны грамположительных бактерий, - являются пирогенами, которые необходимо удалять из фармацевтических препаратов, растворов для инъекций и некоторых сред для культур тканей.
При разработке схемы депирогенизации растворов, содержащих белки и пептиды, необходимо учитывать множество факторов1:
- тип соединения, подвергаемого очистке;
- концентрацию электролитов; рН раствора;
- наличие в растворе других белков или пептидов и их концентрации;
- молекулярный вес белков и их изоэлектрическую точку;
- характер межмолекулярных взаимодействий.
Совокупность этих факторов определяет выбор наиболее эффективного метода удаления пирогенов.
Известно, что молекулярный вес эндотоксинов лежит в диапазоне от 10 до 1000 кДа. Если подвергаемый депирогенизации раствор содержит низкомолекулярные соединения (буфер, раствор аминокислот, нуклеотидов, коротких пептидов), то отделить эндотоксины можно ультрафильтрацией, используя кроссфлоу фильтры на 10 – 20 кДа2.
Однако, в тех случаях, когда белок имеет молекулярный вес, близкий к весу эндотоксина, ультрафильтрация для отделения эндотоксина непригодна.
Использование адсорбционных матриц, в частности смол для хроматографии, на сегодняшний день является одним из главных методов депирогенизации. Метод основан на различии во взаимодействии эндотоксина и компонентов раствора с функциональными группами, иммобилизованными на смоле.
Поскольку эндотоксины обладают низким значением рI (изоэлектрической точки), то в большинстве растворов они имеют отрицательный  заряд. В растворах, рН которых находится в диапазоне между рI эндотоксина и белка, белок и эндотоксин будут противоположно заряжены. Таким образом, наиболее часто при  депирогенизации используют ионообменные смолы3.
Некоторые свойства смол для хроматографии ограничивают возможности их применения. Имеются в виду такие проблемы, как низкие скорости потока, длительное время регенерации, ограниченная химическая стабильность.
Использование мембранных адсорберов позволяет избежать этих проблем. Высокоэффективные и простые в использовании ионообменные мембраны для депирогенизации могут быть использованы как в лабораторных, так и в промышленных масштабах.
Для удаления пирогенов из растворов лекарственных веществ используют адсорбцию на оксиде алюминия, каолине, крахмале, активированном угле, целлюлозе, а также на ионообменных смолах.
К недостаткам этого метода относится одновременная адсорбция и лекарственных веществ, особенно при использовании угля, а также необходимость очистки депирогенизированных растворов от механических включений.
Одним из новых эффективных путей освобождения растворов от пирогенов является ультрафильтрация. Это процесс разделения и фракционирования растворов, при котором макромолекулы (см.м. от 1 тыс. до 1 млн.) отделяются от раствора низкомолекулярных веществ фильтрацией через мембраны1.
Например, при ультрафильтрации через мембранный фильтр «Владилор» с размером пор 100+25 А задерживается более 99% пирогенов -липополисахаридов2.
В устранении пирогенности большую роль играет соблюдение чистоты и стерильности в асептическом блоке.
В инъекционные растворы микроорганизмы попадают с аптечной посудой, предметами, связанными непосредственно с изготовлением растворов, особенно с дистиллированной водой. Поэтому нужно принимать меры, не допускающие попадания микроорганизмов в изготовляемый раствор.
Для получения апирогенной дистиллированной воды в аптеках используют специальные дистилляторы, имеющие устройство для задержки капель неперегнанной воды и закрытия водосборника, в котором вода выдерживается при температуре 80 о С и выше, что препятствует развитию микрофлоры1.
Фармацевты при изготовлении инъекционных растворов должны работать в стерильных халатах и головных уборах, соблюдая правила личной гигиены и обрабатывая пред работой руки в соответствии с инструкцией.
Окна асептической должны быть плотно закрыты, щели наглухо заделаны. Воздухообмены должны быть с преобладанием, притока над вытяжкой для того, чтобы создать подпор наружному воздуху. Подаваемый воздух должен проходить через фильтры, улавливающие пыль и микроорганизмы.
В последнее время выпускаются специальные столы, в которых вмонтированы устройства, подающие на рабочее место чистый воздух (стол монтажный пылезащитный СМП-1), фильтрующая среда, которой снабжен СМП-1, позволяет получить поток стерильного воздуха2.
Соблюдение санитарного режима должно способствовать содержанию микроорганизмов в лекарственных формах в количествах, соответствующих временным гигиеническим правилам.
МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ПИРОГЕННЫХ ВЕЩЕСТВ
В аптеках согласно инструкции, утвержденной приказом Министерства здравоохранения, не менее двух раз в квартал осуществляется бактериологический контроль, объектами которого служат:
вода дистиллированная;
инъекционные растворы до и после стерилизации;
глазные мази после стерилизации;
глазные капли, приготовленные в асептических условиях на стерильной основе;
сухие лекарственные вещества, используемые для приготовления инъекционных растворов;
нестерильные лекарственные формы;
аптечная посуда, пробки, прокладки, прочие материалы;
инвентарь, оборудование, руки, санитарная одежда персонала;
воздух аптечных помещений.
Согласно Государственной фармакопее XI тест на пирогенность проводится биологическим методом на кроликах, основанным на измерение температуры тела животных после внутривенного введения испытуемого препарата1.
Использование млекопитающих, вида, близкого к человеку, позволяет установить влияние испытуемого препарата на целый организм. С помощью испытания на животных возможно определять действие обоих классов пирогенов – «экзо» и «эндо» - токсинов, а также пирогенов небактериальной природы.
Однако этот метод достаточно длителен (4 - 5 часов), дает значительную вариабельность результатов, связанную с индивидуальной чувствительностью (чувствительность животных в 3 - 4 раза ниже, чем у человека), сезонностью.
Таблица 1
Требования к микробиологической чистоте
№
п/п
Наименование
объекта контроля
Требования к микробиологической чистоте
Нормативный
документ
1
Вода очищенная