Микросателлитная нестабильность в колоректальном раке

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ЧТО ТАКОЕ КОЛОРЕКТАЛЬНЫЙ РАК И КАК ОН СВЯЗАН С MSI
1.1 Колоректальный рак
1.2 Колоректальный рак и генетика
ГЛАВА 2. МИКРОСАТЕЛЛИТНЫЙ АНАЛИЗ И МАРКЕРЫ
2.1 NCI - панель
2.2 Анализ микросателлитной нестабильности
2.3 Онкомаркеры
ГЛАВА 3. ФРАГМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

?

Микросателлитная нестабильность в колоректальном раке

По состоянию на июль 2010 года директором NCI является Гарольд Вармус.National Cancer Institute самостоятельно проводит крупномасштабные исследовательские программы в г. Бетесда (штат Мэриленд) и своем подразделении NCI-Frederick в Форт-Детрике, расположенном в г. Фредерик (штат Мэриленд). Кроме того, NCI финансирует исследователей в сфере онкологии в различных регионах США.Американский объединенный комитет по изучению рака и Экспертная комиссия при Национальном институте рака (American Joint Committee on Cancer and a National Cancer Institute-sponsored panel) рекомендуют проведение гистологического исследования как минимум 12 удаленных ЛУ перед тем как дать заключение об отсутствии их поражения. Данная рекомендация основывается на том, что количество исследованных ЛУ является отражениемагрессивности хирурга при выполнении лимфодиссекции во время хирургического вмешательства и корректности идентификации ЛУ во время патоморфологического исследования. Ретроспективные работы показывают, что количество изученных ЛУ в материале, полученном во время выполнения хирургического вмешательства по поводу колоректального рака, ассоциируется с прогнозом заболевания. При колоректальном раке ретроспективно проанализировано множество прогностических факторов, но большинство из них, включая потерю аллели хромосомы 18q или экспрессию тимидилатсинтазы, не были изучены в проспективных исследованиях. В популяционном исследовании, включившем 607 больных колоректальным раком моложе 50 лет, нестабильность миросателлитов, также ассоциированная с СНПРТК, сочеталась с лучшей выживаемостью независимо от стадии заболевания. Решение о выборе метода лечения чаще всего принимается на основании предпочтений врача и пациента, стадии заболевания и в меньшей степени определяется возрастом больного. Также наблюдали различия в общей выживаемости после применения адъювантного лечения в зависимости от расовой принадлежности, вместе с тем не отмечено взаимосвязи между расой пациента и безрецидивной выживаемостью. Это позволяет предположить, что для общей выживаемости большее значение имеет тяжесть сопутствующей патологии в различных популяциях больных.2.2 Анализ микросателлитной нестабильности В последнее время для оценки фармакогеномики различных противоопухолевых агентов, их генотоксического действия на опухолевые и нормальные клетки применяются тест-системы, детектирующие изменения микросателлитных аллельных вариантов хромосомальной ДНК и мутации митохондриальной ДНК. Микросателлитами называются блоки повторяющихся последовательностей ДНК, длиной 1-6 п.н., которые локализованы по всей протяженности генома человека. Важнейшая особенность микросателлитов - это высокий уровень индивидуальных вариаций, вследствие происходящих в этих локусах мутаций: 10-3 – 10-4 на поколение. Однако, как правило, у индивидуумов с отсутствием ярко выраженных патологий определенный набор аллельных вариантов по подавляющему большинству локусов сохраняется на протяжении всей жизни. Соматические изменения в микросателлитных последовательностях, сопровождающиеся делециями или инсерциями одного или нескольких блоков повторов, были названы «микросателлитной нестабильностью». Как известно, высокая микросателлитная нестабильность характеризует генетическую изменчивость (мутаторный фенотип) многих опухолей. Микросателлитная нестабильность была обнаружена во многих опухолях человека, имеющих как наследственную, так и ненаследственную природу, и в клинической практике используется как маркер для определения способности ДНК к репарационным процессам. Анализ высоко полиморфных микросателлитных локусов дает информацию не только об МН, а также позволяет обнаруживать делецию аллелей генов супрессоров в опухолевых клетках. Гены супрессоры опухолей инактивируются мутациями, происходящими в одной аллели гена, с последующей потерей дикой аллели гена. Такое явление получило название «потеря гетерозиготности». Потеря гетерозиготности и МН - это неотъемлемые стадии онкогенеза, их анализ является обязательным при клинической диагностики и рекомендован при молекулярном скрининге колоректального рака. В настоящее время показана взаимосвязь микросателлитных изменений в ДНК и реакции клеток на действие противоопухолевых агентов.Наиболее клинически апробированным молекулярным тестом является анализ опухоли на присутствие упомянутой выше микросателлитной нестабильности (RER+ фенотипа). Микросателлитная нестабильность ассоциирована с целым рядом клинически значимых признаков:1) РТК с микросателлитной нестабильностью отличаются неплохим прогнозом, так как высокая частота соматических мутаций способствует иммуногенности опухоли;2) подобные новообразования чаще отвечают на терапию с применением фторпиримидинов, так как RER+ опухоли характеризуются сниженной способностью к компенсации повреждений ДНК;3) присутствие микросателлитной нестабильности указывает на высокий риск появления независимого, первично-множественного новообразования, т.к. RER+ фенотип зачастую является признаком синдрома наследственного неполипозного рака толстой кишки. Существенно, что тест на микросателлитную нестабильность относительно прост, доступен и может быть выполнен на ретроспективном (архивном) биологическом материале.2.3 ОнкомаркерыСтадия заболевания и степень дифференцировки опухоли являются основными параметрами, определяющими тактику лечения и прогноз при раке толстой кишки (РТК). Однако даже в пределах клинически однородных групп пациентов РТК характеризуется высокой гетерогенностью течения и ответа на терапию; повидимому, подобное разнообразие связано с тем, что под видом одного и того же морфологического типа опухолей скрываются несколько разновидностей заболевания, различающихся по своему молекулярному патогенезу. Предполагается, что знания о молекулярныхвариантах РТК будут способствовать более рациональному осуществлению лечебных мероприятий.По рекомендации National Cancer Institute для определения колоректального рака используются также другие онкомаркеры. Опухолевые маркёры представляют собой группу белков, гормонов, ферментов, рецепторов и других продуктов клеточного метаболизма, которые могут вырабатываться клетками опухоли в повышенном количестве. Большинство опухолевых маркёров также вырабатываются в организме человека в норме, но в значительно меньших количествах.Среди определяемых в плазме крови маркёров РЭА является единственным рекомендованным к использованию. Его следует определять с целью мониторинга эффективности лечения и ранней диагностики рецидивов каждые 2-3 месяца в течение 3 лет после постановки диагно. Степень его повышения также имеет прогностическое значение.MSI - тканевой маркёр колоректального рака. Микросателлиты - повторяющиеся короткие (1-5 нуклеотидов) последовательности ДНК. Микросателлитная нестабильность - потеря или добавление такой последовательности аллеля микросателлита, которая возникает из-за отсутствия гена коррекционной репарации ДНК (MMR).MSI является суррогатным маркёром синдрома Линча, а также может использоваться для определение прогноза и прогноза ответа КРР на адьювантную терапию.MSI является положительным прогностическим маркёром, при её наличии результаты лечения КРР улучшаются на 15%.С другой стороны КРР с MSI реже отвечает на лечение 5-ФУ и его производными. СА 19-9 (карбогидарт-антиген 19-9, сиалированный антиген Льюиса)Природа. Онкофетальный антиген, в норме определяется у плода и в низких концентрациях может определяться на слизистой органов ЖКТ и в поджелудочной железе. Выводится только с желчью, поэтому его уровень резко повышается при любых заболеваниях, вызывающих холестаз. Чувствительность и специфичность. При раке ПЖЖ чувствительность и специфичность достигают 80% и 90% соответственно. При раке желудка и колоректальном раке бывает повышен в 20-40% случаев.Цели исследования.а) Скрининг. Не применяется из-за низкой чувсвтвительности и специфичности. б) Мониторинг эффективности лечения. Основная область применения - рак поджелудочной железы, также применяется при раке желудка, колоректальном раке. в) Прогностическая значимость. Степень повышение коррелирует со стадией заболевания. Некоторые авторы счаитают, что показатели >1000 Eд/мл можно считать критерием нерезектабельности заболевания.г) Дифференциальная диагностика. Может применяться при дифференциальной диагностике панкреатита и рака поджелудочной железы. Для других целей применяется крайне редко из-за недостаточной чувствительности и специфичности. Другие причины повышения. Бывает значительно повышен при наличии холестаза любой природы, умеренно повышается при остром и хроническом панкреатите, циррозе печени, муковисцидозе. Примерно у 5%-10% населения СА 19-9 не вырабатывается (Lewis a-b-).Материал для исследования. Сыворотка крови.Период полувыведения. От 1 до 3 днейРеферентные значения. Менее 37 Ед/мл. Показатели свыше 120 Ед/мл с высокой вероятностью говорят о наличии злокачественного процесса.CA 242 (карбогидрат-антиген 242)Природа. Гликопротеин, аналог СА 19-9, который экспрессируется на друго муциновом апопротеине. Чувствительность и специфичность. При колоректальном раке чувствительность 39%, специфичность - 87%.Цели исследования.а) Скрининг. Не применяется из-за низкой чувсвтвительности и специфичности. б) Мониторинг эффективности лечения. Применяется при раке желудка, колоректальном раке, раке поджелудочной железы. в) Прогностическая значимость. Коррелирует со стадией: повышается у 26%, 26%, 40% и 67% больных КРР Dukes А, B, C, D соответсвенно.г) Дифференциальная диагностика. Не применяется. Другие причины повышения.