микофлора филлоплана Tilia cordata в осенний период

Оглавление
ВВЕДЕНИЕ 3
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 5
1.1. Эпифитная микофлора городской среды 5
1.1.1. Микофлора филлоплана как экологическая группа микроорганизмов 5
1.2. Общая характеристика микобиоты филлоплана, ее формирование, значение ее изучения 11
2. ОБЪЕКТЫ, УСЛОВИЯ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 16
2.1 Условия и объекты исследования 16
2.2. Методы исследования 16
2.2.1.Методы посева и учета микроорганизмов 16
2.2.2. Методы идентификации микроорганизмов 16
2.2.3. Методы культивирования 17
2.2.4. Лабораторная посуда и питательные среды 17
2.2.5. Методы расчета площади суммарной листовой поверхности 17
2.2.6. Методы обработки результатов 17
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 18
3.1. Оценка количественного состава эрифитной микобиоты Загородного парка г. Самара 18
3.2. Анализ эпифитной микобиоты липы сердцевидной, произрастающих на территории Загородного парка г. Самара в сентябре 2013 года 19
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 24
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 25

А. Курбатской; Л.Н. Егоровой ; М.А. Литвинова, Д. Саттон, А. Фотергилл , М. Ринальди, Н.М. Пидопличко 2.2.3. Методы культивированияИспользовали стандартную методику культивирования грибов на твердой среде.2.2.4. Лабораторная посуда и питательные средыДля исследования брали среду Чапека с глюкозой (20 г/л). Стерилизацию проводили при 0,2 атм. В течение 30 мин.Использовали лабораторную посуду (чашки Петри, колбы различных размеров, пробирки), оборудование для посевов. Лабораторную посуду стерилизовали в сушильном шкафу при температуре 165 0С в течении 2 часовСостав среды ЧапекаНа 1 л. Водопроводной воды: глюкозы – 20г, KCl – 0,5г MgSO4 – 0,5г, K2HPO4 – 1г, NaNO3 – 2г, FeSO4 – 0,01г, CaCO3 – 3г, Агар – 15г.2.2.5. Методы расчета площади суммарной листовой поверхностиИзмеряли в сантиметрах длину (a) и ширину (b) в самой широкой части листа. Результаты промеров записывали. Рассчитывали площадь листа (см2) по формуле 1: (1)Аналогичным образом проводили измерения остальных листьев. Определяли среднюю площадь одного листа (ср) по формуле 2:ср = , (2)где Si – площадь отдельных листьев, см2; N – количество листьев2.2.6. Методы обработки результатовПользовались общепринятыми методами статистической обработки данных в биологии с использованием пакета прикладных программ Exel.РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕОценка количественного состава эрифитноймикобиоты Загородного парка г. СамараИсследование численности эпифитных грибов и их качественного состава проводилось в сентябре 2013 года на территории Загороного парка г. Самары Исследовали микобиоту смывов с поверхности листьев древесных растений одного вида – липы сердцевидной (Tiliacordata).По нашим данным, общая численность эпифитных грибов в исследуемый период составляла: для зеленых листьев липы 1 – 864 КОЕ, для желтых листьев липы 1 – 6265 КОЕ. Для липы 2 эти показатели составили 182 КОЕ и 5496 КОЕ, соответственно (рис. 1). Возможно, это связано с тем, что желтые литья являются отражением деструктивных процессов, связанных с патогенностью для растений некоторых представителей обнаруженной микобиоты.Рис. 2. Общее число микроорганизмов, выделенных с листовой поверхности липы сердцевидной (липа 1 и 2) Загородного парка города Самары в сентябре 2013 годаАнализ эпифитной микобиоты липы сердцевидной, произрастающих на территории Загородного парка г. Самара в сентябре 2013 годаНами анализировалась эпифитная микобиота липы сердцевидной (Tiliacordata), произрастающей на территории Загороного парка г. Самары.Видовая идентификация колоний, высеянных с поверхности листьев липы выявила 6 видов грибов: Alternariaalternata, Auerobasidiumspp., Alternariaconsortiale, Myrotecium, Actinomyces, Cryptococcus.Для удобства идентификации на первоначальном этапе колонии были подвергнуты классификации, делящей их на следующие категории: Альтернарии, Аэробиоз, Неизвестные колонии, Актиномицеты, Красные, Белые.В частности, это обусловлено тем, что видовая идентификация мелкоспоровых видов грибов рода Alternaria по морфологическим признакам затруднена. Для экологических целей систематики применяют объединение мелкоспоровыхальтернарий, являющихся сильными аллергенами, в комплекс A. alternatasensulato.При анализе соотношений видов колоний получены результаты, отраженные на рисунках 2-5. Так, наиболее высокие показатели доли в филлоплане изучаемого вида растения отмечены для красных и белых колоний (рис. 2-4). Сопоставление динамики состава микобиотыфиллоплана желтых и зеленых листьев обнаружило признаки значительных различий.Так, отмечается сходство доминирующих видов филлоплана для желтых и зеленых листьев. Общими для них являются преобладающие красные и белые колонии (рис. 3-6). Тем не менее, для зеленых листьев, помимо доминирующих красных и белых колоний, характерно заселение альтенариями и возбудителем аэробиоза, тогда как для желтых листьев характерен микобиотический паттерн, характеризующийся абсолютным доминированием красных и белых колоний, их доля составляет 54% и 43%, соответственно. От растения к растению (сравнение липы 1 и липы 2) характерное соотношение представителей микобиоты сохранялось (рис. 3, 4, 5).Рис. 3. Процентное соотношение грибов, выделенных с листовой поверхности липы сердцевидной (липа 1) Загородного парка города Самары в сентябре 2013 года Для одного из доминантов филлоплана зеленых листьев Alternariaalternatаsensulato — характерно постоянное присутствие в течение всего вегетационного периода. Основным местообитанием сапрофитных представителей грибного комплекса Alternariaalternatаsensulato является растительный опад и филлоплан древесных, кустарниковых и травянистых растений. Несмотря на конец вегетационного периода (сентябрь), обнаруженные нами виды микромицетов в филлопланелипы скорее всего свидетельствуют о том, что эти грибы уже входят в состав микробного ценоза листа.Рис. 4. Процентное соотношение грибов, выделенных с листовой поверхности липы сердцевидной (липа 2) Загородного парка города Самары в сентябре 2013 года Из более ранних наблюдений известно, что представители грибного комплекса Alternariaalternatаsensulato часто доминируют в воздушной среде города Самары и их доля в течение лета – осени колеблется от 30 до 70 % от общей численности грибов [14].Рис. 5. Процентное соотношение грибов, выделенных с листовой поверхности липы сердцевидной (липа 1 и липа 2) Загородного парка города Самары в сентябре 2013 года В весенний и осенний периоды источником спор альтернарий в воздухе города является разлагающийся опад, а в середине лета отмечается снижение микробиологической активности почв и опада [9]. Вероятно, в летние месяцы обогащение воздушной среды спорами грибов рода Alternariа может осуществляться за счет их размножения в филлоплане древесных растений [14].Относительно состава белых колоний, можно предположить, что они сформированы дрожжами рода Cryptococcussp., доля которых растет с июля по сентябрь, особенно на листовой поверхности липы. Об этом, отчасти, свидетельтсвует и преобладание белых колоний именно в желтом листе, что характерно для липы 2 (рис. 4). Известно, что многие виды дрожжевых грибов являются потребителями растительных экссудатов, поэтому ряд авторов связывает эту особенность со спецификой выделительной функции листовой поверхности [14]. Рис. 6. Соотношение видов грибов, выделенных с листовой поверхности липы сердцевидной (липа 1 и 2) Загородного парка города Самары в сентябре 2013 года В целом же можно заключить, что в зеленых листьях, по сравнению с желтыми, состав микобиоты разнообразнее, и более уравновешен по содержанию всех обнаруженных представителей. В частности,в зеленых листьях уменьшена доля красных колоний за счет соответствующего увеличения возбудителя аэробиоза (рис. 6).Наиболее стабильно, как от растения к растению, так и от образца к образцу, вне зависимости от цвета листьев, поверхность листа заселяют белые колонии.ЗаключениеПроведенные исследования показали, что количественный и качественный составы микобиотыфиллоплана незначительно варьирует, что связано с различной степенью экссудации и разным биохимическим составом ее у растений, разной бактерицидной активностью и степенью проявления фунгицидных свойств эпифитов. В целом же исследование микобиоты листовой поверхности липы, произрастающе на территории Загородного парка, в 2013 году обнаружило сходство состава и динамики видов. Желтые листья характеризовались значительно большей численностью эпифитных грибов, что можно связать с фитопатогенными свойствами последних. Общими для желтых и зеленых листьев являются преобладающие красные и белые колонии. Тем не менее, для зеленых листьев, помимо доминирующих красных и белых колоний, характерно заселение альтенариями и возбудителем аэробиоза, тогда как для желтых листьев характерен микобиотический паттерн, характеризующийся абсолютным доминированием красных и белых колоний, их доля составляет 54% и 43%, соответственно.Некоторые из обнаруженных микроорганизмы сигнализируют об антропогенных нагрузках и служат индикаторами для оценки качества окружающей среды.Сведения о видовом составе эпифитной микофлоры из экологической нишифиллосферы дают основания говорить о разнообразии эпифитов, входящих в различные таксономические группы. Выделены доминантные представители эпифитной микофлорыфиллосферы, характерной для региона г. Самары.Список литературыБабьева И.П., Чернов И.Ю. Биология дрожжей. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2004. - 221 с.Барчева А. В. Изучение эпифитных микромицетовфиллосферы древесных растений. Астрахань: Издательство АГТУ, 2008. - 23 с.Билай В.И, Коваль Э.З. Аспергиллы. Киев: Наукова думка, 1988. - 202 с.Возняковская Ю.М. Взаимоотношения растений с микроорганизмами ризосферы и филлосферы // Агрономическая микробиология. Л.: Колос, 1976. - С. 144–179.Возняковская Ю.М. Некоторые аспекты взаимодействия здоровых растений с микроорганизмами // Методологические проблемы аллелопатии. Киев: Наукова думка, 1989. - С. 65–72.Дементьева А.И. Фитопатология. — М.: Агропромиздат, 1985. — 215 с.Заикина И. А. Эпифитная микрофлора здоровых растений. Пенза: РИО ПГСХА, 2007. Ч. 2. - С. 40–44.Колесар В. А., Сафин Р. И. Особенности развития патогенных микромицетов листьев картофеля и влияние на них иммунизаторов растений. Казань: Издательство КГАУ, 2008. – 345 с.Марфенина О.Е. Антропогенная экология почвенных грибов. М.: Медицина для всех, 2005. 195 с.Микология сегодня / под ред. Ю.Т. Дьякова, Ю.В. Сергеева. М.: Национальная академия микологии, 2007. Т. 1. - 376 с.Нескороженый Б. Ф., Резиу М. Ж. Оценка антагонистической активности эпифитной микрофлоры филлоплана яблони. Киев: Издательство ВНИИТЭИа, 1989. – 329 с.Нетрусов А.И., Егорова М.А., Захарчук Л.М. Практикум по микробиологии. — М.: Издательский центр «Академия», 2005. — 571 с.Нетрусов А. И. Экология микроорганизмов. М.: Академия, 2004. - С. 272.Овчинникова Т.А., Панкратов Т.А. Мониторинг воздушной микофлоры города Самары // Мониторинг окружающей среды. Тольятти, 2003. - С. 170–174.Саттон Д., Фотергилл А., Ринальди М. Определитель патогенных и условнопатогенных грибов. М.: Мир, 2002. - 486 с.Полякова М. М. Выделение и идентификация эпифитных дрожжей плодовых деревьев. Астрахань: Издательство АГТУ, 2008. – 234 с.